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第三组 2.梯度稀释 取1mL1:10稀释液注入含有9mL无菌水的试管中,另取一支1mL无菌吸管反复吹息,此液为1:100稀释液。按照此操作方法,制备10倍稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用一次1mL无菌吸管。根据污染状况的估计,选择2至3个适宜的稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10倍递增稀释的同时,每个稀释度分别吸取1mL样品匀液于2个无菌平皿中。同时分别吸取1mL样品稀释度加入2个平皿作空白对照。 3.溶解培养基 及时将15至20mL的马铃薯--葡萄糖琼脂培养基倾注平皿中,并转动平皿使其混合均匀。 4.培养 待培养基凝固后,将平板倒置,28±1℃培养5d,观察并记录 5.菌落计数 肉眼观察,记录各稀释倍数和相应的霉菌和酵母菌数,以菌落形成单位CFU表示。 实验结果 实验结论 根据实验结果可知,我们组空白实验没有长菌,说明无菌操作做的很完善。 根据国标GB19296-2003可知,霉菌含量≦10cfu/mL,酵母菌≦10cfu/mL可知,酵母菌含量3.0×104cfu/mL大于10cfu/mL不符合国标规定,霉菌1.0cfu/mL≦10cfu/mL符合。 饮料霉菌和酵母菌检测 实验目的 能阐述真菌的形态特征和生物学特征 能阐述食品霉菌和酵母菌检验的基本流程和注意事项 能阐述真菌毒素的危害和常见的检验方法 能阐述真菌产毒的影响因素和防治措施 实验材料 1)器材 250mL锥形瓶2个 试管2个 1mL吸量管3个 20mL吸量管1个 10mL吸量管1个 100mL量筒1个 玻璃棒 平皿8个 电炉 洗耳球 250mL烧杯1个 天平 试管架 恒温箱(25℃-28℃) 酒精灯 空白载玻片 盖玻片 接种针等 2)培养基和试剂 马铃薯-------葡萄糖琼脂培养基、灭菌蒸馏水等 实验流程 检样 报告 菌落计数 每皿中加入15----20mL马铃薯-----葡萄糖---琼脂培养基,28±1℃ 选择2---3个适宜稀释度的样品匀液,各取1mL分别加入无菌培养皿内 10倍系列稀释 25g(mL)样品+225mL无菌蒸馏水,均质 √ √ 实验步骤 1.样品的稀释 (1)以无菌吸管吸取25mL样品至承有225mL无菌蒸馏水的锥形瓶中,充分混匀、制成1:10的样品匀液。 (2)用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml,注入含有9ml灭菌蒸馏水的吸管内,充分震荡做成1:100的均匀稀释液。 稀释度 平板1(CFU) 平板2(CFU) 平均值(CFU) 稀释度选择 1 酵母菌 多不可计 多不可计 多不可计 霉菌 1 1 1 √ 10-1 酵母菌 多不可计 多不可计 多不可计 霉菌 0 0 0 10-2 酵母菌 232 362 297 √ 霉菌 0 0 0 空白 0 0 0 酵母菌数报告值(cfu/mL) 297×100=29700≈30000=3.0×104≧10 霉菌数报告值(cfu/mL) 1×1=1.0≦10 10-1 10-1 稀释度为1 稀释度为1 10-2 10-2 空白
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