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甲基红的解离平衡常数的测定 一、目的要求 掌握723PC分光光度计和pHS-10A型pH计的原理与使用方法 测定甲基红的解离常数 二、实验原理 二、实验原理 三、主要仪器与试剂 723PC分光光度计１台，pHS-10A型pH计１台 容量瓶(50mL2只,25mL8只) 移液管(5mL、10mL、25mL各１只) 甲基红溶液：0.1g晶体甲基红溶于50mL95%的乙醇中，用蒸馏水稀释至200mL 20％乙酸钠， 0. 2mol.L-1乙酸， 0. 1mol.L-1 HCl， 2mol.L-1 HCl 四、仪器操作方法 四、仪器操作方法 四、仪器操作方法 四、仪器操作方法 四、仪器操作方法 五、实验主要操作步骤 五、实验主要操作步骤 五、实验主要操作步骤 六、数据处理 七、思考题 上一内容 下一内容 回主目录 ?返回 甲基红的分子式： ，简写成HMR;具有酸 (HMR)与碱式(MR-)两种形式，在碱性溶液中呈黄色，酸性溶液中呈红色，在酸性溶液中以两种形式存在： HMR H+ + MR- 解离平衡常数： C(MR-)/c(HMR)的比值用分光光度法测定计算 　　式中：Ａ1、A2—分别为HMR和MR-的最大吸收波长处所测得的总的吸光度；k1,HMR、k1,MR-、k2,HMR、K2,MR-分别为HMR和MR-在最大波长λ1、 λ2处的摩尔吸收系数。 　　各物质的摩尔吸收系数值可由作图法求得。分别配制pH=2的各种浓度的甲基红酸性溶液，在波长λ1分别测定各浓度的吸光度，然后对浓度作图得到一条通过原点的直线，由直线的斜率可以计算k1,HMR值，其余各摩尔吸收系数的求法相似。 “方式设定”键(MOED):用于设置测式方式，透射比方式；吸光度方式和浓度直读方式。使用功能键，根据提示将标样的浓度值或因子输入仪器。 “100%/0ABS”键：用于自动调节100%T(100%透射比)或0ABS(零吸光度);当波长改变时，一定要调整100%或0ABS。 “0%”键：用于自动调整０％透射比。仪器开机后自检的过程中已经将０％的参数保存在微处理器中，一般情况下无需使用此键；仪器长时间使用，需要调整０％透射比。 工“波长设定”键(　Δ):用于设置分析波长。 “功能”键(FUNC)：输入已知标准样的浓度值，按功能键一次；输入已知标准样品Ｋ因子，按功能键二次。 １打开仪器电源开关，使仪器预热20分钟。仪器通电后，进入自检状态，自检结束后波长自动停在560nm处，测量方式自动设定在透射比方式（％Ｔ），并自动调100%和0%T。 ２按“方式键(MODE)将测式方式设置为吸光度方式。透射比方式，显示器显示“XXXnm,XXX.XT”吸光度方式，显示器显示“XXXnm,X.XXXAbs”。 ３按“波长设置”键(　Δ):设置所需要的波长，如340nm ４将参比溶液与被测溶液分别倒入比色皿中，用镜头纸将比色皿擦拭干净，光学面保持透明状态． ５打开样品室盖，将盛有溶液的比色皿分别插入比色槽中，盖上样品盖；将参比溶液推入光路中，按“100%Ｔ”键调整零ＡＢＳ。 ７将被测溶液推入光路中，此时显示器显示是被测样品的吸光度。 　　若仪器要与计算机连接，先打开仪器，再打开计算机，打开光谱应用软件，点击连接按钮即可。 １.按前面介绍的方法开启分光光度计，并与计算机连接好，使其处于工作状态。 ２.测定甲基红酸式(HMR)和碱式(MR-)的最大吸收波长 　Ａ液：取0.50mL甲基红储备液于50mL容量瓶中，加入5mL0.1mol.L-1HCl溶液，用蒸馏水稀释至刻度，溶液的pH大约为２，甲基红以酸式ＨＭＲ存在。 B液：取1.00mL甲基红标准溶液于50mL容量瓶中，加入1mL20%NaHAc溶液，用蒸馏水稀释至刻度，溶液的pH大约为8，甲基红以酸式ＭＲ-1存在。 测定上述两种甲基红总浓度相等的溶液的在350-600nm之间吸光度随波长的变化，找出最大吸收波长λ１、 λ２ 。 ２.检验HMR和MR-是否符合朗伯－比耳定律，并测定它们在λ１、λ２下的吸收波系数 　　取五只50ml容量瓶，分别加入甲基红溶液0.10ml, 0.15ml,0.20ml,0.30ml,0.40ml,再加入1ml 0.2mol.L-1 HCl溶液。另取五只50ml容量瓶，加入甲基红溶液0.40ml, 0.60ml,0.80ml,1.00ml,1.20ml,再加入1ml 20%乙酸钠溶液配制一系列待测液，分别稀释至刻度。在波长λ１、λ２下测定这些溶液及原液的吸光度。由吸光度对浓度作图，计算在λ１下甲基红酸式(HMR)和碱式(MR-)的摩尔吸收系数及其他的摩尔吸收系数。 ３.计算不同pH(HMR)和(MR-)的相对量 　　取四只50mL的容量瓶分别加入0.60mL甲基红溶液和1.00mL 20%乙