细胞科学报告选题1112.pptVIP

转基因动物 转基因动物 1982年美国华盛顿大学Palmiter等将大鼠生长激素基因导入小白鼠的受精卵里，再将这一受精卵植入借腹怀孕的母鼠体内，生下一个比正常体格大一倍的“超级小鼠”。 按照转基因小鼠的思路，人们已经成功的获得了转基因大鼠、鸡、山羊、绵羊、猪、兔、牛、蛙、鱼等。 转基因动物技术 概念 研制的方法 技术的优点 发展前景 转基因动物 一、转基因动物概述 （一）转基因动物概念 转基因动物是指通过基因工程对DNA进行体外操作，添加或删除一个特殊的DNA序列，然后导入早期的胚胎干细胞中，产生遗传结构得以修饰的动物，其改变的性状可以遗传给后代。 这些改变包括： （1）外源DNA片段至少整合到一条染色体上； （2）由于外源DNA的插入使任何一个基因发生改变； （3）由于外源DNA的插入或内源基因的删除使染色体发生重排； （4）有意识地导入可以持久存在的遗传实体。 （二）转基因动物的命名 1．符号 (1)一个转基因符号由以下三部分组成： TgX (YYYYYY) ＃＃＃＃＃ Zzz， TgX=方式； (YYYYYY)=插入片段标示； ＃＃＃＃＃= 实验室指定序号； Zzz = 实验室注册代号； 二、转基因动物的基本原理和方法 （一）基本原理 将改建后的目的基因用显微注射等方法注入实验动物的受精卵，然后将此受精卵再植入受体动物的输卵管中，使其发育成携带有外源基因的转基因动物，人们可以通过转入外源基因培育优良品种的工程动物等。 （二）转基因动物的关键技术 Ⅰ显微注射法 三、转基因动物的应用 （一）提高动物优良性状、改善动物产品质量 （二）动物抗病育种 （三）生产药用蛋白 （四）生产人用营养保健品 （五）生产可用于人体器官移植的动物器官 （六）建立诊断、治疗人类疾病及新药筛选的动物模型 技术优点 1.转基因动物可以提高生产能力。（瘦肉型猪） 2.转基因能增强抗病能力。（转基因鲑鱼） 3.转基因能生产生物医学产品。（转基因猪生产人血红蛋白） 技术的忧患 1.基因污染： 人工组合的基因，可能会通过转基因作物或家养动物扩展到其他栽培作物或自然界野生物种，并成为后者基因的一部分。这就是基因污染。 2.基因武器 运用遗传工程技术，按人们需要，在一些致病细菌或病毒中，接入能对抗普通疫苗或药物的基因，产生具有显著抗药性的致病菌；或者在一些本来不会致病的微生物体内接入致病基因，而制造出新的生物制剂。 转基因生物的危害.flv * * 含外源基因的载体 基因微注射 移植受精卵 小鼠出生 转基因鼠的检测 繁殖后代 (2) 方式 转基因符号通常冠以Tg字头。 随后的一个字母（X）表示DNA插入的方式： H 代表同源重组； R 代表经过逆转录病毒载体感染的插入； N 代表非同源插入。 （3）插入片段标示 An 匿名序列； Ge 基因组； Im 插入突变； Nc 非编码序列； Rp 报告基因； Sn 合成序列； Et 增强子捕获装置； Pt 启动子捕获装置。 2.举例 C57BL/6J-TgN(CD8Ge) 23 Jwg： 来源于美国杰克逊研究所（J）的C57BL/6品系小鼠被转入人的CD8基因组（Ge）；转基因在Jon W.Gordon (Jwg) 实验室完成，获取于一系列显微注射后得到的序号为23的小鼠。 1.外源目的基因的分离 2.外源目的基因与转性基因表达启动子、增强子、报告基因等构件的拼接重组 3.重组DNA导入生殖细胞或胚胎干细胞 4.胚胎移植技术 5.鉴定及筛选 6.目的基因整合率及表达效率的检测 1.采取受精卵 采取受精卵的方法分为获得自然排卵的受精卵的方法和以激素诱发排卵的方法，还有采取未受精卵，然后在体外受精的方法。 2.向受精卵雄性原核注入DNA溶液 通过微分干涉显微镜观察受精卵，会看到两个大的原核。两个核不久即可融合，接着核膜消失。雄性原核要比雌性原核能容纳更多的DNA溶液，一般是向雄性原核注入DNA溶液。 3.向假妊雌小鼠移植 （1）假妊雌小鼠的制作 （2）将操作卵移植至输卵管 4.转基因动物的检测 Ⅱ 逆转录病毒法 原理： 逆转录病毒的核酸为一条单链RNA分子，其基因由两部分组成，一是顺式作用序列，为病毒复制和整合所必需；二是反式作用序列，编码病毒的包装蛋白。将外源基因取代反式作用序列构建成重组载DNA。 另外将包装蛋白基因导入专门的细胞并使之整合到染色体上，形成包装细胞。