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微生物的培养与利用 高考专题复习 北京高考考试说明中的要求 微生物种类及其代谢 微生物的范畴： 结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物，如酵母菌、细菌、放线菌、霉菌、蓝细菌和病毒等。 微生物种类及其代谢 这些微生物的同化作用和异化作用类型分别是什么？ 同化作用： 生物体从外界获取营养物质，转化为自身组成物质的过程。 异化作用： 生物体自身物质分解，放出能量，排出废物的过程。 微生物种类及其代谢 同化作用类型： 自养型：直接利用环境中的无机物合成自身所需要的有机物。如进行光合作用的绿色植物、蓝细菌。 硝化细菌——化能合成作用：利用化学反应释放的化学能，将无机物合成自身的有机物。 异养型：直接利用环境中的有机物合成自身所需要的有机物。如各种动物、大多数细菌等。 微生物种类及其代谢 异化作用类型： 有氧呼吸型（需氧型） C6H12O6+6O2+6H2O→6CO2+12H2O+能量 无氧呼吸型（厌氧型） C6H12O6 → 2C2H5OH+2CO2+能量 C6H12O6 → 2C3H6O3+能量 微生物种类及其代谢 微生物包括哪些类型？ 构成微生物的细胞类型有哪些？ 不同微生物代谢类型有哪些？ 同化作用+异化作用=代谢类型 微生物种类及其代谢 微生物种类及其代谢 微生物种类及其代谢 微生物的培养 培养基 按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 基本营养成分——水、碳源（有机碳、无机碳）、氮源（有机氮、无机氮）、无机盐（调节渗透压） 配制要求——调整pH，添加特殊营养物质（维生素）等 微生物的培养 碳源 有机碳源：牛肉膏、酵母提取物 无机碳源： 氮源 有机氮源：蛋白胨、尿素等 无机氮源：NH3 、N2等 微生物的培养 培养基分类 按照物理性质分类： 固体培养基——常用的凝固剂为琼脂 液体培养基 按照用途分类： 普通培养基： 选择培养基：加入或缺少某种物质 鉴别培养基：加入特殊物质，鉴定某种微生物存在与否 微生物的培养 基本操作技术——无菌条件 灭菌与消毒，避免杂菌的污染 消毒的方法： 高温（煮沸），酒精、氯气等化学药剂，紫外线照射 灭菌的方法： 灼烧、干热、高压蒸汽灭菌 微生物的培养 倒平板（无菌条件下进行） 固体培养基灭菌、融化、倒入培养皿、冷却凝固待用 接种后，盖盖、倒置、培养（防止冷凝水影响单个菌落的形成） 微生物的培养 接种的方法（无菌条件下进行） 平板划线法（培养分离出单个菌落，操作相对比较简便） 平板涂布法（按梯度稀释培养液、培养分离出单个菌落，操作有些复杂） 微生物的培养 微生物计数方法 活菌计数——样品稀释度足够高时，培养基表面只生长1个菌落（来源于样品稀释液中的1个活菌）。根据平板上菌落数，推测样品中大约含有多少活菌。结果一般用菌落数而不是活菌数表示。 显微观察计数——红细胞计数板，观察数量，再根据浓度比例计算出菌体数量。 微生物的培养 微生物的培养 血细胞计数板的取样与计数方法 微生物的培养 （二）16格×25格 酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数 大肠杆菌的培养和分离 大肠杆菌的培养和分离 大肠杆菌的培养和分离 为什么要先将大肠杆菌培养在LB液体培养基中？ 液体培养基—— 扩大培养，使培养物浓度增加，以便分离 然后将大肠杆菌接种到固体平板培养基上培养，目的是什么？ 固体培养基——分离获得单个菌落，消除杂菌污染，筛选高表达量的菌株的简便方法。 分离以尿素为氮源的微生物并计数 实验目的 1．使用专一的培养基（含有尿素）分离专一的细菌（有脲酶的细菌）　　　 2．使用指示剂颜色的变化检知酶（脲酶）所催化的反应 3．说明测定细菌数量的原理与方法 分离以尿素为氮源的微生物并计数 实验原理 （1）琼脂和琼脂糖 琼脂是一种未被纯化的混合物，主要成分为琼脂糖和琼脂果胶，还含有少量的含氮化合物，及其它有机杂质和不溶性杂质。琼脂作为微生物固体培养基不可缺少的组成成分，其优点是： ①其主要成分不能被微生物利用； ②可使培养基固化； ③不影响培养基中其他营养物质被细菌吸收。 分离以尿素为氮源的微生物并计数 实验原理 本实验是用琼脂糖代替琼脂作为微生物培养基的固化剂，其目的是：尽可能使培养基中只含尿素一种含氮化合物，以防止琼脂中的含氮化合物被以尿素为氮源的细菌