第四章发酵工艺控制修改版.ppt

3、溶氧作为发酵中间控制的手段之一 ? 补糖后，溶氧出现明显下降的趋势 ? 因此可利用溶氧作为参数来控制加料的次数、流加速度和加入量 2）提高罐压 3）改变通气速率 优点： 不需引入外界物质（如消泡剂），可减少培养液性质复杂化程度，便于产物的提取。 缺点： 不能从根本上消除引起稳定泡沫的因素 ? 主要是聚二甲基硅氧烷及其衍生物 ? 结构通式为: (CH3)3Si[Si(CH3)2]nSi(CH3)3 ? 单独使用效果差，常与分散剂（微晶二氧化硅）一起使用 2）从污染的杂菌类型分析 污染耐热的芽孢杆菌，多数是因培养基灭菌不彻底或设备存在死角所致； 污染无芽孢杆菌、球菌等不耐热菌，可能是从蒸汽的冷凝水中带来的，或空气系统不严造成。 3）从发酵罐及批次分析 个别发酵罐连续染菌，较多地是由于设备问题而造成的。如阀门的渗漏或罐体破损，特别是蛇形管的穿孔，有时不易察觉。有时设备破损引起的染菌会出现每批染菌时间前移现象。 ◆ 有些噬菌体感染需要双价阳离子(Ca2+、Mg2+)吸附或DNA注射才能进行。使用络合剂可获得较好的效果，如0.2-0.3%多磷酸钠、0.1-0.2%肌醇六磷酸 (phytic acid)、0.2-0.5%柠檬酸或草酸等可抑制乳糖发酵短杆菌的噬菌体。 ◆ 非离子去污剂如聚乙烯二醇酯酸、聚羟乙烯烷基醚、吐温20、吐温60均能明显地抑制噬菌体吸附、复制，或引起流行性感染。 ◆ 有些抗生素能抑制多种噬菌体，氯霉素（1?g/ml）对丙酮丁醇乳酸棒杆菌的HM噬菌体有良好的抑制作用，对宿主菌无影响。 第 七 节 发 酵 终 点 的 判 断 不同类型的发酵，要达到的目标不同，因而发酵终点的判断标准也不同 1） 一般对发酵及原材料成本占整个生产成本主要部分 的发酵产品，主要追求提高： 产率 （kg / m3 ·h) 得率 （Kg产物 / kg基质） 发酵系数 （kg产物 /罐容积 m3·发酵周期h） 2）如下游提取、精制占主要部分，则除了要求高的产率和 发酵系数外，还要求高的产物浓度。 t T — 培养放罐、检修的工作时间 tD — 打料、灭菌时间 tL — 停滞期 分批培养的生产率 发酵总的生产周期： t = 1/μmlnXf/X0 + tT + tL + tD t T — 培养放罐、检修的工作时间 tD — 打料、灭菌时间 tL — 停滞期 X0和Xf —— 起始和终了时的细胞浓度； μm —— 最大比生长速率 ◆ 如要提高总的生产率则有必要缩短发酵周期。 就是要在产物合成速率较低时放罐，延长发酵虽然略能提高产物浓度，但生产率下降，且消耗每千瓦电力，每吨冷却水所得产量也下跌，成本提高。 ◆ 放罐时间对下游工序有很大影响 放罐时间过早，会残留过多的养分，如糖、脂肪、可溶性蛋白等，对提取不利，这些物质能增加乳化作用或干扰树脂的交换； 放罐时间太晚，菌丝自溶，不仅会延长过滤时间还会使一些不稳定的抗生素单位下跌，扰乱提取工段的作业计划。 2、影响泡沫的因素 1）与通气量、通气速度和搅拌速度等有关 2）与所用培养基的成分有关 玉米浆、蛋白胨、花生饼粉、黄豆饼粉、酵母粉、糖蜜是主要的发泡因素；且起泡能力随品种、产地、贮藏和加工条件而不同。 3）与培养基的灭菌方法、灭菌温度和时间有关 例如：糖蜜培养基从110℃升高到130℃ （皆为30分钟），发泡系数增加一倍 四、泡沫的控制 一） 机械消泡 内部：耙式、梳齿式、涡轮式 外部：离心式、碟片式 二） 化学消泡 1、消泡机理 1）降低泡沫的机械强度，使泡沫破裂 2）降低液膜的表面黏度，使液膜的液体流失，导致泡沫破裂 当泡沫表层存在着由极性的表面活性物质形成的双电层时，可以加入另一种具有相反电荷的表面活性剂，以降低泡沫的机械强度；或加入某些具有强极性的物质与发泡剂争夺膜上的空间，降低液膜强度，使泡沫破裂。 当泡沫的液膜具有较大的表面黏度时，可以加入某些分子内聚力较小的物质，以降低液膜黏度 2、消泡剂选择的原则： ① 对发酵过程无毒，对人、畜无害，不影响生物合成。 ② 消泡作用迅速，效果高和持久性能好。 ③ 能耐高压蒸汽灭菌而不变性，在灭菌温度下对设备无腐蚀性或不形成腐蚀性产物。 ④ 不影响以后的提炼过程。 ⑤ 不干扰分析系统，如溶解氧、pH测定仪的探头。 ⑥ 消泡剂的来源多，价格低，添加装置简单。 ⑦ 最好还能做到不影响氧的传递。 1）天然油脂 3、消泡剂的种类 常用豆油、玉米油、米糠油 （能兼作碳源） 2）聚醚类 3) 高级醇类 主要是十八醇 4）硅酮类 3、消泡剂的使用 1）分散 ◇ 消沫剂的消沫效果与使用方式很有关系。 ◇ 消沫剂加到发酵罐中能否起作用取决于它的扩散能