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第一节
第一课时;;病毒;SARS病毒 禽流感病毒;朊病毒(蛋白质病毒);真菌;; 了解有关培养基的基础知识,进行无菌技术的操作,进行微生物的培养。;(2)按培养基的物理形态分:
液体培养基
半固体培养基
固体培养基;各种培养基的具体配方不同,但一般都包括哪些成分?
答:不管哪种培养基,一般都含有水、碳源、和氮源、 无机盐等营养物质。
注: 另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需,而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。
;二 无菌技术:无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。;1、灼烧灭菌:
2、干热灭菌:160-170 ℃下加热1-2h。
3、高压蒸气灭菌:100kPa、121 ℃下维持15-30min.;分类;常识;三、实验操作;【补充】培养基的配制原则:;1.配制:计算、称量、熔化
2.调节pH: 用3%的HCI/NaOH调节
pH 7.0--- 7.2
3.分装:分装过程中注意不要使培养基沾
在 管口或瓶口上,以免沾污棉塞
而引起污染。分装三角烧瓶的量
以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
4.包扎:; 5.灭菌:
将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中,塞上棉花塞,包上牛皮纸,再放入高压蒸气灭菌锅,在压力为100kPa、温度为121℃,灭菌15~30min。
将培养皿用旧报纸包裹,放入干热灭菌箱内,在160~170 ℃下灭菌2h。
6.倒平板:
待培养基冷却到50 ℃左右时,在酒精灯附近倒平板。2d后观察平板,无杂菌污染才可用来接种.
7.无菌检查:
将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时,以检查灭菌是否彻底。;倒平板:;菌种的保存;1.培养基灭菌后,需要冷却到50 ℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?;3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置?;选择培养基;2、纯化大肠杆菌:;;;微生物的恒温培养;微生物的恒温培养;问题讨论; 2.在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?;四、课题成果评价 ;本课题知识小结:;【典例解析】;例2.下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是:
A.防止杂菌污染 B.消灭杂菌
C.培养基和发酵设备都必须灭菌
D.灭菌必须在接种前;编号;(3)若除去成分②,加入(CH2O),该培养基可用于培养 。
(4)表中营养成分共有 类。
(5)不论何种培养基,在各种成分都溶化后分装前,要进行的是 。
(6)右表中各成分重量确定的原则是 。
(7)若右表培养基用于菌种鉴定,应该增加的成分是 。;解析: 对于一个培养基,它能培养何种微生物,要看它的化学成分。当然这只适用于合成培养基,如果是一个天然培养基就不能从培养基的成分上区分它是培养何种微生物的。分析化学成分要从营养物质的类型出发。右表中的营养物质有水、无机盐、氮源三类,缺乏碳源和特殊营养物质。对特殊营养物质,有的微生物是不需要的,但没有微生物是不需要碳源的。该培养基中没有碳源,说明培养的微生物是从空气中获得碳源的,即可培养的微生物就是自养型微生物了。该培养基中加入了过量食盐,就可以成为金黄色葡萄球菌鉴别培养基,但金黄色葡萄球菌是异养型微生物,这个培养基就还需要加入有机碳源。该培养基若加入(CH2O),培养基中就有了碳源,但除去成分②,却使培养基中没有了氮源,这时就只能用于培养固氮微生物了。对于菌种鉴定,往往用的是固体培养基,而表中没有凝固剂,需要加入常见的凝固剂——琼脂。 ;谢谢大家
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