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复习思考题 (1) 什么是广义的植物组织培养?什么是狭义的植物组 织培养? (2) 什么是外植体? (3) 按照外植体的不同,植物组织培养可以分成几类? 比 较常用的是哪些? (4) 植物组织培养有哪些特点? (5) 你认为植物组织培养技术在当前的农业生产上有什 么价值?为什么? 植物离体培养的理论,源于19世纪30年代德国植物学家Schleiden和动物学家Schwann提出的”细胞学说“,其主要观点:细胞是生物体的基本结构单位,由它构成整个生物个体;同时认为植物细胞又是在生理上、发育上具有潜在的全能性功能单位。Schwann还指出:”每一个细胞应该可以独立生活和发展,假如具有的条件正如它存在于有机体内一样…….“。 1902年德国著名植物学家Haberlandt根据细胞学说,提出高等植物的器官和组织可以不断分割,直至单个细胞的观点,这种单个细胞是具有潜在的全能性功能单位。 3. 1955年米勒(Miller)等人发现了激动素(kinetin)。不久即知道激动素可以代替腺嘌呤促进发芽,并且效果可增加3万倍。 2. 1953-1954年缪尔(Muir)把单细胞放在一张铺在愈伤组织上面的滤纸上培养,使细胞发生了分裂,即实施了看护接种技术,使单细胞培养获得初步成功。 4. 1957年,Skoog和Miller提出植物激素控制器 官形成的概念;上述控制器官分化的激素模式变为激动素与生长素的比例关系。 这方面的成功发现,有力地推动了植物组织培养的发展。 5. 1958年,美国植物学家斯图尔德(Steward)等人,用胡萝卜根韧皮部的细胞进行培养,得到了完整植株,并且这一植株能够开花结实。 首次证实了Haberlandt在五十多年前关于细胞全能性的预言 6. 1958年,Wickson和Thimann指出,应用外源细胞分裂素CTK可促成在顶芽存在的情况下打破腋芽的休眠。 后来,Murashige利用这一方法发展了快繁技术,广泛的应用于植物的快速繁殖。 7. 1958-1959年,Reinert和Steward分别在胡萝卜愈伤组织培中形成体细胞胚。这是一种不同于通过芽和根的分化而形成植株的再生方式。 综上所述,在这一发展阶段中,通过对培养条件和培养基成分的广泛研究,特别是对B族维生素、生长素和细胞分裂素在组织培养中作用的研究,已经实现了对离体细胞生长和分化的控制,从而初步确立了组织培养的技术体系,为以后的发展奠定了基础。 1960年,科金Cocking——开创植物原生质体培养和体细胞杂交研究工作。(用真菌纤维素酶从番茄幼根分离得到活性原生质体) (三)迅速发展阶段 同年,Kanta——植物试管受精首次成功。 1960年,Morel——提出了一个茎尖离体无性繁殖兰花 的方法——迅速建立起兰花工业; 以后相继在烟草、水稻、小麦、玉米、番茄、辣椒、草莓、苹果等多种植物培养中获得成功,其数目达到160多种,其中烟草、水稻和小麦等的花药育种培养在中国取得了引入注目的成就。 1964年印度Guha和Maheshwari成功地在毛叶曼陀罗花药培养中,由花粉诱导得到单倍体植株,从而促进了花药和花粉培养的研究; 1971年,Takebe等在烟草上首次由原生质体获得了再生植株——理论上证明了无壁的原生质体同样具有全能性,而且在实践上为外源基因的导入提供了理想的受体材料。 80年代中期以来,对禾谷类作物的原生质体培养也相继告捷,在这方面中国学者做出了重要贡献。 1973年Carlson等通过两个烟草物种之间原生质体融合,获得了第一个体细胞杂种,Cocking等倡导的原生质体培养和体细胞杂交,研究得到了迅速发展,已经能使矮牵牛和烟草属的杂种细胞增殖分化生成杂种植株。 (1)微繁技术广泛应用 (2)花药培养取得显著成绩 (3)原生质体培养取得重大突破 概括起来,这一阶段的成就体现在: (4)基础研究 在整个植物组织培养发展的历史中,我国学者做出多方面的贡献,除了前述的崔徵的研究成效以外,还有1993年李继侗等关于玉米等植物离体根尖培养的研究工作,以及罗士韦关于幼胚和茎尖培养,李正理关于离体胚的研究培养、王伏雄等关于幼胚的研究培养工作。 第三节 植物组织培养的应用 1.快速繁殖种苗(rapid propagation) 用组织培养的方法进行快速繁殖是生产上最有潜力的应用,包括花卉观赏植物、蔬菜、果树、大田作物及其他经济作物。快繁技术不受季节等条件的限制,生长周期短,而且能使不能或很难繁殖的植物进行增殖。 一、农业上的应用 植物在
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