DNA重组技术应用基本实际操作程序.pptVIP

（3）花粉管通道法： ①操作方法：在植物花受粉后，花粉形成花粉管还未 愈合前期，剪去柱头，然后，滴入DNA（含目的基 因）使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞 ② 特点:十分简便经济 ③实例：转基因抗虫棉 1、目的基因导入植物细胞的方法 2、将目的基因导入动物细胞 （1）方法：显微注射法 （3）程序： 含目地基因的表达载体提纯 取卵（受精卵） 显微注射 受精卵 新性状动物 （2）受体细胞： 受精卵 3、将目的基因导入微生物细胞 ①微生物作受体细胞原因： 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对少 ②常用细胞：大肠杆菌 ③常用方法：Ca2+处理获得感受态细胞 ④过程： Ca2+处理 大肠杆菌 感受态 细胞 感受态细胞 吸收DNA 表达载体 与感受态 细胞混合 1.导入过程完成后，全部受体细胞都能摄 入重组DNA分子吗？ 真正能摄入重组DNA分子的受体细胞很少。 2.目的基因进入受体细胞后，是否都能稳定维持和表达？ 不一定，需要检测 思考 四、目的基因的检测与鉴定 探针 15N 15N 转基因生 物的DNA 14N 14N （1）检测转基因生物染色体的DNA上是否插入 了目的基因 基因探针： 放射性同位素等标记的含目的基因DNA分子 方法—— DNA分子杂交技术 变性 变性 1、检测——分子水平的检测 变性