实验三离体蛙心灌流讲义.ppt

实验三离体蛙心灌流;一、实验目的;1、心肌的生理特性： 2、两栖类动物的心起搏点： 3、心肌兴奋性的周期性变化：;有效不应期 = 收缩期 + 舒张早期 ;1、心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境（离子浓度、pH等），内环境的变化直接影响到心脏的正常节律性活动。 2、因此可用人工灌流的方法，观察灌流液成分的改变对离体心脏活动的影响。 无Ca2+任氏液； 任氏液（1% KCl；1% CaCl2；2% CaCl2)。 ;1、神经调节：在体心脏受交感神经和迷走神经的双重支配。 交感神经末梢释放NE（去甲肾上腺素），使心肌收缩力加强，传导速度加快，心率加快，即产生正性变时、变力、变传导作用； 迷走神经末梢释放Ach（乙酰胆碱），使心肌收缩力减弱，心肌传导速度减慢，心率减慢，即产生负性变时、变力、变传导作用 。 2、体液调节 0.01% Adr（肾上腺素） 0.01% Ach（乙酰胆碱） ;三、实验器材及药品;实验药品： 任氏液 无Ca任氏液 1 % KCl 1 % CaCl2 2 % CaCl2 0.01% Ach 0.01% Adr ; 四、手术操作 ;（腹面） ;2. 蛙心插管（操作难点）;蛙心插管步骤小结：;3.游离蛙心;五、仪器连接;将插好离体心脏的套管固定在支架上，用蛙心夹夹住少许心尖部肌肉，再将蛙心夹上的系线与张力传感器相连。;六、软件操作;1.描记正常蛙心收缩曲线 　　 　　　曲线疏密：代表心跳频率。 　　　曲线的规律性：代表心室的节律性。 　　　曲线的顶点水平：代表心室收缩的程度。 　　　曲线的基线：代表心室舒张的程度。;2.期前收缩和代偿间歇;3.改变灌流液成分对心脏活动的影响 ; （1）吸出插管内全部任氏液，换入无钙任氏液，观察心缩曲线变化，待效应明显后，吸出灌流液，用新鲜任氏液换洗3次，直至心缩曲线恢复正常。; （2）加1-2滴1% KCl于新换入的任氏液中，观察心缩曲线的变化。待出现效应后，用新鲜任氏液换洗3次至曲线恢复正常。; （3）加入1-2滴1% CaCl2于新换入的任氏液中，观察心缩曲线的变化。待出现效应后，用新鲜任氏液换洗3次至曲线恢复正常。; （4）加入1-2滴0.01% Adr于任氏液中，待效应出现后，用任氏液换洗至曲线恢复正常。;（5）加入1-2滴0.01%Ach于任氏液中，待效应出现 ??，用任氏液换洗至曲线恢复正常。;（6）钙僵： 加入4-5滴２% CaCl2于新换入的任氏液中，观察心缩曲线的变化。;八、注意事项; 观看实验录像……;九、讨论分析;部分结果分析;高K+任氏液，心跳明显减弱甚至停跳于舒张状态 ;高Ca2+，心缩加强，舒张不完全，甚至停于收缩状态 ;部分结果分析;乙酰胆碱，心缩减弱，心率减慢，兴奋传导速度变慢;心肌的生理功能依靠内环境的稳态; 各种离子对心肌收缩力的影响主要依赖Ca2+来实现。