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4.计算 X3 =(C×v1 × V)∕(m× v2 ×1000)×100 式中: X--样品中还原糖的含量(以葡萄糖计),%; C--葡萄糖标准溶液的浓度,mg/ml; v1-- 滴定10 ml费林氏溶液(甲、乙液各5 ml)消耗葡萄糖标准溶液的体积,ml; v2--测定时平均消耗样品溶液的体积,ml; V--样品定容体积,ml; m--样品质量,g; 第三节 糖的测定方法 二.还原糖的测定方法 (二)直接滴定法(斐林氏溶液法) 注意事项! (1) 本方法测定的是一类具有还原性质的糖,包括葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖等,只是结果用葡萄糖或其他转化糖的方式表示,所以不能误解为还原糖=葡萄糖或其他糖。 第三节 糖的测定方法 二.还原糖的测定方法 (二)直接滴定法(斐林氏溶液法) (2)分别用葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖标准品配制标准溶液分别滴定等量已标定的费林氏液,所消耗标准溶液的体积有所不同。证明即便同是还原糖,在物化性质上仍有所差别,所以还原糖的结果只是反映样品整体情况,并不完全等于各还原糖含量之和。如果已知样品只含有某种还原糖,则应以该还原糖做标准品,结果为该还原糖的含量。如果样品中还原糖的成分未知,或为多种还原糖的混合物,则以某种还原糖做标准品,结果以该还原糖计,但不代表该糖的真实含量。 第三节 糖的测定方法 二.还原糖的测定方法 (二)直接滴定法(斐林氏溶液法) 注意事项! 三.蔗糖的测定 1.原理:样品除蛋白质后,其中的蔗糖经盐酸水解转化为还原糖,用还原糖的测定方法,确定样品中蔗糖的含量。 ?? 实际上测定还原糖包括两部分:一是样品中原有的还原糖、二是蔗糖经酸水解后的还原糖。 第三节 糖的测定方法 2.方法 吸还原糖样品处理稀释液50mL→于100ml容量瓶→加入→于68-70度水浴上15分→冷却→加甲基红2滴→中和→定容→取此溶液按还原糖的测定方法测定。 第三节 糖的测定方法 三.蔗糖的测定 2.计算 ? ?????????????????100???????? 100 ??????? F (? ------? -? ------- ) ???????????????V2????? ? V1 蔗糖%=-----------------------------╳ 100╳0.95 ??????????????????50 w ╳ -----? ╳ 1000 ??????????????????25 式中:F:10ml斐林氏试液相当于转化糖的质量mg。 V1:测定时消耗未经水解的样品稀释体积ml V2:测定时消耗经过水解的样品稀释体积ml w:原测定还原糖时样品的重量(G) 1000:将毫升换算成克 0.95:分子的蔗糖经水解后成为2分子的还原糖(一分子的葡萄糖和一分子的果糖)蔗糖的分子量为342,后来成为2×180.则342/360=0.95.所以转化糖换算到蔗糖应乘以0.95. 第三节 糖的测定方法 三.蔗糖的测定 一.?总糖的测定 食品中的总糖主要指具有还原性的葡萄糖,果糖,戊糖,乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖(水解后为1分子葡萄糖和1分子果糖),麦芽糖(水解后为2分子葡萄糖)以及可能部分水解的淀粉(水解后为2分子葡萄糖)。还原糖类之所以具有还原性是由于分子中含有游离的醛基(-CHO)或酮基(=C=O)。 第三节 糖的测定方法 测定总糖的经典化学方法都是以其能被各种试剂氧化为基础的。这些方法中,以各种根据斐林氏溶液的氧化作用的改进法的应用范围最广。在这里我们主要给大家介绍铁氰化钾法,蒽酮比色法,斐林氏容量法。斐林氏容量法由于反应复杂,影响因素较多,所以不如铁氰化钾法准确,但其操作简单迅速,试剂稳定,故被广泛采用。蒽酮比色法要求比色时糖液浓度在一定范围内,但要求检测液澄清,此外,在大多数情况下,测定要求不包括淀粉和糊精,这就要在测定前将淀粉,糊精去掉,这样就使操作复杂化,限制了其广泛应用。 第三节 糖的测定方法 一.?总糖的测定 (一)铁氰化钾法 1.原理:转化糖都具有还原性质,在碱性溶液中能将铁氰化钾还原,根据铁氰化钾的浓度和检验滴定量可计算出含糖量。其反应为下: C6H12O6+6K3[Fe(CN)6]+6KOH →(CHOH)4·(COOH)2 + 6K4[Fe(CN)6]+ 4H2O 滴定终了时,稍过量的转化糖即将指示剂次甲基兰还原为无色的隐色体。 第三节 糖的测定方法 一.?总糖的测定 2.试剂 1)1%的次甲基兰指示剂 2) 盐酸(水解作用) 3)10%和30%的NaOH溶液 4)1%铁氰化钾(贮存特色瓶,
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