06第六章外源基因的表达.pptVIP

第六章 外源基因的表达 第一节 基因表达机制 1.3 mRNA延伸和稳定性 转录启始后, RNA聚合酶延伸mRNA,至终止子处终止。 mRNA应在细胞中保持稳定的拷贝数：mRNA有半衰期，必须不停转录，才能保持稳定的拷贝数。 1.4 mRNA的加工 真核生物mRNA转录后需要剪切和拼接的加工过程。 基因转录、翻译的动画演示 真核生物基因转录、转录后加工及翻译过程 避免表达蛋白降解的方法: 采用融合蛋白表达系统 采用分泌蛋白表达系统 构建包涵体表达系统 选择无蛋白水解酶的受体。 基因沉默的形成机制主要有三种： 位置效应的基因沉默：整合入甲基化程度高、转录活性低的异染色体上，一般不表达。 转录水平的基因沉默：启动子的甲基化或外源基因的异染色质体。 转录后水平的基因沉默：RNA水平上, 基因可转录,但mRNA合成后被降解或被反义RNA或蛋白质封闭. 转基因植物和转基因动物中常见。 序列特异性：几个保守的序列框。 方向性：启动子正反两种方向中只有一种具有启动功能。 位置特性：启动子只能位于所基因的上游或基因内的前端。 种属特异性：不同种属、不同组织的启动子不同。 原核生物启动子 转录起始位点:多为CAT, 从第二个碱基开始。 -10区：TATAAT，一般在起始位点上游6bp处。 -35区：TTGACA，一般在起始位点上游35bp处。其中前个碱基高度保守 间隔区：-10区与-35区存