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动物中毒病学实验 临床兽医学教研室内诊组 实验一、常见中毒病实验室检测（基础性实验） 一、实验目的 1.了解兽医临床毒样的采集、保存及送检等方法。 2.掌握亚硝酸盐中毒、有机磷中毒、食盐中毒及青叶中毒的定性检验方法。 二、实验内容 1.毒物样品的采集：常见中毒病毒物样品的采集见表1。 2.毒物样品的包装：常见毒样的数量及包装方法见表2。 3.样品的保存及送检 保存：样品采集后，应置4℃下或加入无水乙醇保存，农村应包装严密后置井里或温度相对比较低的地方暂时保存。 送检：样品采集并包装好后，应置低温冰盒中及时送检。 4.亚硝酸盐中毒检验 被检样及试剂 被检样：剩余饲料、呕吐物、胃内容物或血液。将被检样用馏水浸泡10至30min，定性滤纸过滤，留滤液备用。 试剂：格列斯粉（主要成分为甲萘胺、对氨基苯磺酸及酒石酸） 实验原理：硝酸盐在酸性条件下与氨基苯磺酸作用生产重氯化物，再与甲萘胺混合成一种偶氨色素，呈现鲜红色反应。 检测方法：取被检液1ml于试管中，加入格列斯粉0.1g，振荡混匀，观察颜色反应，如含亚硝酸盐，立即呈红色反应。（颜色变化与亚硝酸盐含量关系见表3） 5.敌百虫或敌敌畏中毒检验 被检样和试剂 被检样：剩余饲料、呕吐物、死亡动物的胃内容物、血液及肝脏 试剂：1%间苯二酚乙醇液、5%氢氧化钠 实验原理：敌百虫或敌敌畏在碱性环境中水解成醛类物质，然后再与间苯二酚反应生产粉红色的化合物。 检验方法：取被检液1ml于试管中，加入1%间苯二酚乙醇液1—2滴、5%氢氧化钠液1—2滴，振荡混匀，在酒精灯上加热至沸，出现红色为阳性反应。 6.食盐中毒检验 被检样和试剂 被检样：呕吐物、胃肠内容物、血液及肝脏 试剂：0.1mol/L硝酸汞、0.2%刚果红指示剂 实验原理：氯化钠中氯离子与硝酸汞中汞离子结合，生产氯化汞。 检验方法：取被物25g于烧杯内，加入蒸馏水200ml，经4—5h振荡浸泡，然后加入蒸馏水250ml，过滤，取滤液25ml于试管中，滴加指示剂2滴，用0.1mol/L硝酸汞滴定至开始出现沉淀，液体呈现轻微透明为止。带入公式计算。检样中食盐含量（%)=硝酸汞消耗的ml数×0.235 7.磷化锌中毒检验 被检样和试剂 被检样：剩余饲料、呕吐物、死亡动物的胃内容物 试剂：5%亚铁氰化钾、10%氢氧化钾 实验原理：在微酸性溶液中，锌与亚铁氰化钾生成亚铁氰化锌白色沉淀，此沉淀不溶于稀酸而溶于碱中。 检验方法：取被检液2ml于试管中，加入5%亚铁氰化钾5—8滴，如有锌存在则产生白色沉淀，再加入10%氢氧化钾沉淀溶解，为阳性反应。 8.青杠叶中毒检验 被检样和试剂 被检样：尿液、胃内容物 试剂：三氯化铁、乙醇 实验原理：青杠叶中主要含鞣酸，鞣酸与三氯化铁反应，生成鞣酸铁而呈现（灰蓝）黑色反应。 检验方法：取被检液适量于试管中，加三氯化铁液2--3滴，再加乙醇1—2滴，摇匀，立即出现灰蓝色为弱阳性反应，黑色为强阳性反应。 三、实验注意事项 1.认真实验，规范操作，严防实验事故发生。 2.仔细观察实验反应，详细记录实验结果。 3.课堂保存秩序，课后安排人员做好清洁卫生。 4.课后一周内写出实验报告上交老师。 实验二、动物有机磷农药中毒病例的复制与诊疗 （创新性实验） 一、实验目的 1.掌握畜禽有机磷中毒病的诊断方法。 2.了解畜禽有机磷中毒病的临床防治方法。 3. 掌握有机磷农药的简易定性检验方法。 二、实验内容 1.实验动物：健康猪，10~20kg/头，1头/班。 2.实验器材：体温计、消毒器、听诊器、兽医治疗箱（含各种药品、一次性注射器）、采血管等。 3.实验步骤 实验课教师请学生对动物进行较全面的临床检查 完成三大指标的测定，并记录检查结果 完成病畜的一般临床检查，并记录检查结果 完成各系统的临床检查，并记录检查结果 猪有机磷农药中毒病例的人工复制：保定动物，插入胃管，按10mL/kg BW给动物灌服10%有机磷农药，并记录下投毒时间。 定期观察动物的表现和进行临床检查。 根据临床检查，请学生提出实验室检验项目，并提出检验计划和方案。 在实验课教师的指导下，学生完成相关实验室检验项目的检测与抢救。 实验班学生分组讨论病情，得出初步诊断。 实验教师主持全班讨论，并对各组所得结果进行评述 实验教师对疾病诊断进行修正。对有机磷中毒病的临床预防措施进行介绍。 三、实验注意事项 1.积极动手，认真进行临床检查，仔细观察病例的异常表现，并随时进行记录。 2.善于动脑，详细分析病情，提出实验室检验方案及疾病诊断。 3.实验室操作要规范，注意爱护实验仪器和设备。 4.做好实验场所的清洁卫生，每位同学在课后1周内写出实验报告上交老师。 实验三、亚硝酸盐中毒自然病例的诊疗 （综合性实验） 一、实验目的 1.掌握家畜亚硝酸盐中毒的临床诊断及治