23基因工程载体-人工染色体载体09.pptVIP

第三节 其他载体 2012.09 其他载体 一、人工染色体 二、植物基因工程载体 三、动物基因工程载体 一、人工染色体 二、植物载体 Plant cloning vectors Ti质粒:侵染广泛的双子叶植物 T-DNA或T-区(T-region)：约20kb，包含专化冠瘿碱生化合成和冠瘿瘤生长的基因，随机地整合到植物染色体上。 结构特点：两端具有25个碱基对的顺向重复序列，但重复不是完全的。25个碱基对的序列称为T-DNA的边界序列(T-DNA border sequence)。去除右边界序列，将使T-DNA失去转移和整合的功能；左边界的缺失，对致瘤性无明显影响。 毒性区域即vir(virulence)区域:引起T-DNA转移的区域。长度约35kb，和T-DNA处于不同位置 植物Ti质粒载体 T-DNA区域内的所有基因与转移无关，所以将致瘤基因全部缺失即卸甲(disarmed)后，将细菌抗生素的抗性基因或其它序列插入到这个区域，形成的T-DNA仍可将RB至LB内的序列转移并整合到植物基因组。 Vir区的毒性基因是T-DNA转移所必需的，毒性基因可以顺式及反式两种方式控制T-DNA转移。 2、Ti质粒载体 Disarmed Ti vectors（非致瘤载体） Cointegrate vectors（共整合载体） Binary vectors（双元载体） 1） Disarmed