第6章-原核细胞基因工程.pptVIP

以寡聚形式表达目的蛋白的优缺点 目的蛋白高效表达 在不提高质粒拷贝数的前提下，增加目的基因的拷贝数，可以 稳定表达小分子短肽 在一定程度上改善表达量 目的产物回收困难 短肽由于缺乏有效的空间结构，在细菌细胞中的半衰期较短。 串联短肽具有与蛋白质相似的长度及空间结构，因而抗蛋白酶 降解的能力大幅度提高 寡聚短肽需要裂解和进一步分离，才能获最终分子，但裂解后 的短肽分子容易出现序列不均一性 “十二五”普通高等教育国家级规划教材 寡聚型目的蛋白表达系统的构建 P SD gene gene gene gene T1 T2 H2N COOH Met Met Met Met mRNA CNBr 基本战略： “十二五”普通高等教育国家级规划教材 寡聚型目的蛋白表达系统的构建 构建举例： P SD T1 T2 EcoRI BamHI AATTCAGATCT GTCTAGA G CCTAG EcoRI Bgl II BamHI EcoRI BamHI Bgl II GATCT A G CCTAG EcoRI BamHI Bgl II EcoRI BamHI Bgl II EcoRI + BamHI Bgl II + BamHI BamHI “十二五”普通高等教育国家级规划教材 整合型异源蛋白的表达 以整合形式表达目的蛋白的优缺点 目的基因表达稳定 整合型的