低温保存技术在顽拗性种子种质保存中的利用-广西植物.pdf

维普资讯 广 西 植 物 Guihaia 27(5)：759— 764 2007年 9月 低温保存技术在顽拗性种子种质保存 中的利用 唐安军1，2，龙春林1 (1．中国科学院 昆明植物研究所，昆明 650204；2．中国科学院 研究生院，北京 100049) 摘 要：由于顽拗性种子不耐脱水且对低温敏感 ，常规保存方法难 以达到长期保存的 目的。因此，(超)低温 保存顽拗性种子种质是最理想的方法。顽拗性种子的低温保存 ，应用较多的是玻璃化法和两步法。诸多因素 影响着低温保存的成败 ，如种子或胚的含水量水平 、溶液低温保护剂效应 、降温冰冻与解冻方式 、水合过程以 及后培养等，这些需深入探索与解决。除顽拗性种子脱水耐性和低温敏感性机理外，植物细胞的冻害和抗冻 机理也亟需探明，以便找到最佳冷冻方法，制定长期保存种质基 因的最佳方案。 关键词 ：顽拗性种子；(超)低温保存；玻璃化法 ；两步法 ；种子含水量 ；脱水方式 中图分类号：Q945 文献标识码：A 文章编号：1000—3142(2007)05—0759—06 Cryopreservationof - 一 TANG An-Jun1，2，LONG Chun-Lin1* (1．KunmingInstituteofBotany，TheChineseAcademyofSciences，Kunming650204，China； 2．GraduateSchool，TheChineseAcadmeyofScineses，Beijing100049，China) Abstract：Beingsensitivetodesiccationandlow temperature，therecalcitrantseedscannotbestoredwithconventional methods．However，cryopreservationhasbeenconsideredasthemosteffectivemeans．Asfarascryostorageofrecal～ citrantseedsisconcerned，vitrificationandtwo-stepfreezinghavebeenappliedinmanystudies．Unfortunately，there aresomefactors，includingwatercontentofseedsorembryonicaxes，effectsofcryopretectantsin solutions，cooling rateandthawing，rehydration andafter-thawing culturethatinfluencesucceeding in cryopreservation．Toproduce normalplantsaftercryopreservationofrecalcitrantseedsorembryonicaxes，acarefullydefinedsequenceofmanipula— tionsisneededtobesolved．Besidesthemechanismsofdesiccationtoleranceandsensitivitytolow temperatures，the freezingandantifreezingmechanismsofplantcellsarealsoascertainedimminentlyinordertodigoutthemosteffec— tivelong-term storagemethodthroughseed-genebank． Keywo