基因工程概述2013.pptVIP

化 学 合 成 基因序列已知 同源蛋白基因 文库是将某一物种基因组DNA或cDNA以克隆的方式（质粒或噬菌体）保存在大肠杆菌中的方式。 构建cDNA文库 文库筛选 免疫学筛选 目的基因表达 目的基因在宿主细胞中的表达需具备如下几个特点： 1.完整的表达框（启动子-核糖体结合位点-目的基因-标签-转录终止子）。其中选择组成型、组织器官特异性、发育特异性和环境诱导型启动子可以控制目的基因的特殊表达模式的需求。原核表达需要用SD序列作为核糖体结合位点，而真核表达需要有帽子位点即可。 2. 控制表达水平，尽量减少蛋白产物对宿主细胞的正常生活的干扰，产生分泌蛋白是一个不错的选择， 3.为了方便检测和纯化蛋白产物，可以表达一个融合标签（HA、HISx6、C-Myc、 Flag、 GST等）。 原核表达体系 真核表达体系 体外转录翻译体系 表达载体 SDSof the lysate of uninduced and induced host bacteria?E. coli?BL21(DE3) containing the control expression vector or the recombinant expression vector and the purified recombinant protein.?M?protein marker,?1?lysate of?E