普通生物化学实验-update.pdf

生物化学基础实验 教学课件 生化与分子生物学实验室 于乐军 实验一 生物化学实验安全及技能培训 实验二 Folin-wu法定量测定血糖的含量 实验三 蛋白质的等电点测定及盐析反应 实验四 Folin-酚试剂法测定蛋白质浓度 实验五 氨基酸的纸层析 目 实验六 醋酸纤维薄膜电泳血清蛋白 录 实验七 胰蛋白酶的活力测定 实验八 酶促反应影响因素研究 实验九 酵母RNA的提取及鉴定 实验十 水果中维生素C的定量测定 实验十一 聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳牛血清 生物化学实验技能培训 通过生物化学实验应该做到： ⑴学习设计一个实验的基本思路，掌握各个实验的 基本原理，学会严密地组织自己的实验，合理地 安排实验步骤和时间。 ⑵训练实验的动手能力，学会熟练地使用各种生物 化学实验仪器。 ⑶学会准确翔实地记录实验现象和数据的技能，提 高实验报告的写作能力，能够整齐清洁地进行所 有的实验，培养严谨细致的科学作风。 ⑷掌握生物化学的各种基本实验方法和实验技术， 为今后参加科研工作打下坚实的基础。 实验室规则 ⑴实验前必须认真预习实验内容，明确本次实验的 目的和要求，掌握实验原理。 ⑵实验时自觉遵守实验室纪律，保持室内安静，不 大声说笑和喧哗。 ⑶实验过程中要听从教师指导，认真按照实验步骤 和操作规程进行实验。若想改进和设计新的实验 方法，必须取得教师的同意。实验时认真进行实 验记录，实验完毕及时整理数据，按时上交实验 报告。 ⑷实验台面、称量台、药品架、水池以及各种实验 仪器内外都必须保持清洁整齐，药品称完后立即 盖好瓶盖放回药品架，严禁瓶盖及药勺混杂，切 勿使药品（尤其是NaOH）洒落在天平和实验台 面上，毛刷用后必须立即挂好，各种器皿不得丢 弃在水池内。 ⑸配制试剂按实验实际使用量配制，多余的重要试 剂和各种有机试剂要按教师要求进行回收；昂贵 试剂需要回收，不得丢弃。 ⑹配制的试剂和实验过程中的样品，尤其是保存在 冰箱和冷室中的样品，必须贴上标签、写上品名、 浓度、姓名和日期等，放在冰箱中的易挥发溶液 和酸性溶液，必须严密封口。 ⑺强酸强碱以及其他实验废液必须倒入废液桶。电 泳后的凝胶和各种废物不得倒入水池，只能倒入 废物桶。 ⑻使用贵重精密仪器应严格遵守操作规程。使用分 光光度计时不得将溶液洒在仪器内外和地面上。 仪器发生故障应立即报告教师，未经许可不得自 己随意检修。 ⑼实验室内严禁吸烟、饮水和进食，严禁用嘴吸移 液管和虹吸管。易燃液体不得接近明火和电炉， 凡产生烟雾、有害气体和不良气味的实验，均应 在通风条件下进行。 ⑽ 实验完毕必须及时洗净并放好各种玻璃仪器，插 好自动部分收集器上的试管，保持实验台面和实 验柜内的整洁。 ⑾ 严禁抄拿他组仪器，不得将器皿遗弃在分光光度 计内和其他实验台面上，打破了玻璃仪器要及时 向教师报告，并自觉登记，学期结束时按规定进 行处理。 ⒀ 每日实验完毕，值日生要认真做好实验室的卫生 值日工作。最后离开实验室的实验人员，必须检 查并关好水、电、门、窗。 Folin-Wu法 定量测定血糖的含量 糖的重要生理功能： 1.氧化供能 2.人体的主要组成成分之一 糖蛋白、糖脂、蛋白多糖、核糖；转化成脂肪 和某些非必需氨基酸等 3.糖代谢紊乱→供能障碍→一系列代谢变化 血糖及血糖水平的概念： 血糖：指血液中的单糖：葡萄糖 血糖水平：血浆中葡萄糖浓度 血糖总维持在恒定水平：3.9∽6.7mmol/L 血糖的来源和去路 血糖测定的目的和意义 临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的 主要依据