应用PCR.RFLP技术检测乙型肝炎病毒变异rtl233V.PDFVIP

【基础研究】 应用PCR．RFLP技术检测乙型肝炎病毒变异rtl233V 郭红英，李新艳，毛日成，尹有宽，张继明· (复旦大学附属华山医院感染病科，上海200040) 摘要：目的建立一种应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR·RFLP)分析技术检测乙型肝炎病毒(HBV)变 异rtl233V的方法。方法参照GenBank收录的HBV基因逆转录(RT)区序列设计PCR引物，根据HBVRT区rt233位野生 产物分别用BstI107I和Bspl4071两种限制性内切酶进行酶切，观察酶切产物琼脂糖凝胶电泳条带变化。并以变异型和野生 型质粒的不同配比，分析该检测方法的敏感性。结果本研究建立的PCR：RFLP方法可同时检测野毒株和a1233V变异株。 PCR扩增后，野毒株和rtl233V变异株的PCR产物长度均为255 bp bp。以Bstll071酶切，野毒株质粒的PCR产物可以切成75 和180 l 80bp两段，野毒株质粒的PCR产物长度保持不变