人的端粒酶逆转录酶基因沉默对HeLa细胞增殖、凋亡的影响.pptVIP

人的端粒酶逆转录酶基因沉默对HeLa细胞增殖、凋亡的影响 国内外研究现状 正常细胞经过有限次数的分裂即进入衰老阶段，停止增殖而最终衰亡.但肿瘤细胞似乎成功地摆脱了这种衰老的束缚，表现出无限制加速增殖的永生化能力。这使人们意识到衰老与肿瘤这两大生命科学中的难题之间可能存在着某种联系和转换的必然环节.近年来端粒酶的发现和“端粒假说”的提出，使有关衰老和肿瘤的研究有了长足的进展。包括Science和Cell等在内的国际著名期刊，正以逐年增加刊登论著、述评、视点文章的形式，对端粒-端粒酶这一研究方向作出了肯定，认为有可能对衰老、肿瘤等重大生物学问题的解决产生深远的影响。 研究方向 探讨靶向人端粒酶逆转录酶（hTERT）的基因沉默对癌细胞生物学行为的影响 采用RT-PCR、Western blot检测筛选出于扰效果好的孤对siRNA，转染HeLa细胞，提取总RNA，逆转录为cDNA，荧光标记后与癌症基因芯片杂交，以两对干扰序列的实验结果相一致的标准来确定差异表达基因。本研究成功筛选出干扰效果良好的两条序列。芯片经扫描后分析杂交结果，EGFR、VEGF、bcl-2三个基因表达下调，TRAIL基因表达上调。认为端粒酶逆转录酶除了具有延长端粒功能外，还参与调控若干与细胞增殖、凋亡相关的基因表达。 立项依据 端粒酶：一种反转录酶，由蛋白质和RNA两部分组成核糖蛋白复合体，其中RNA是一段模板序