qPCR引物设计课件.ppt

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2019-10-13 发布于江苏
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qPCR引物设计;引物要求：（1）设计的时候尽量靠近基因的3端，这样能最大限度地保证扩增效率（2）尽量跨越内含子，这样可以保证检测有无基因组污染（3）两条引物的Tm值不要相差太大（4）产物长度保证在80～200bp之间，最长300 bp。（5）避开保守区域 ;1. NCBI Primer blast;Primer blast;Primer blast;Primer blast;Primer blast – 结果;专业的定量PCR设计软件：beacon Designer 1 搜索引物保守序列（与转录组比较） ;专业的定量PCR设计软件：beacon Designer 2 设计引物;3 qPCR引物特异性验证 ;