干细胞和动物克隆-公开课件（讲义）.ppt

* * 第十章 干细胞和动物克隆技术 第一节 干细胞的生物学特性 一、干细胞的概念 具有无限的或可被延长的自我更新 能力，并且能形成至少一种高分化后代 的细胞。 (2)组织干细胞：源于成熟组织的干细胞。 如：骨髓造血多能干细胞、神经干 细胞等。 二、干细胞的类型 1、按其来源将干细胞分为两类 (1)胚胎干细胞：源于胚胎组织的干细胞。 包括ES细胞（胚胎干细胞）和EG细 胞（生殖干细胞，在性腺中产生精子或 卵细胞）。 (2)多能干细胞：只具有分化成组织源性类型 细胞能力的干细胞。如:多能造血干细胞。 2、按其发育潜能将干细胞分为三类 (1)全能干细胞：可分化成各种类型的组织细 胞。如:ES细胞、EG细胞。 (3)单能干细胞：只具有产生一种分化细胞能 力的干细胞。如:更新皮肤的干细胞等。 三、干细胞的分化途径 1、干细胞→定向祖细胞→成熟细胞（末端 分化细胞） 2、定向祖细胞：无自我更新能力，增殖能 力有限，有一定的分化潜能，是干细胞 最终形成某种末端分化细胞的祖先细胞。 3、末端分化细胞：指分化标记基因全部表 达、无继续分裂能力、寿命较短的细胞， 处在发育完成阶段的一种功能末端细胞。 如：红细胞。特殊：神经细胞寿命很长。 无 暂时有 长期有 参与受损组织的再生能力 无 有限 有 产生分化后代的能力 无 无 无限 自我更新能力 无 有限 无限 增殖能力 有 开始具备 没有 是否表达分化标记蛋白 末端分化细胞 定向祖细胞 干细胞 表1 干细胞、定向祖细胞和末端分化细胞 的区别 四、干细胞的不对称分裂 用于产生子代和进行自我维持。包括 稳定的不对称分裂和群体不对称分裂。 1、稳定的不对称分裂 一个干细胞分裂产生的 2个子代细胞 中，一个总是分化为定向祖细胞，继续分 裂将成为末端分化细胞补充组织；另一个 总是为干细胞，以维持干细胞的数量保持 不变。 在单细胞生物和无脊椎动物（酵母、 果蝇、线虫）中很普遍。 2、群体不对称分裂 单个干细胞分裂产生的 2个子代细胞 或都是干细胞，或都是定向祖细胞，属于 对称分裂；就整个干细胞群体分裂产生的 干细胞和定向祖细胞的数量来看，属于不 对称分裂。 大多数哺乳动物的干细胞用此方式。 群体不对称分裂具有连续性，使机体对 各种突发损伤及正常的生理需要能很快产生 相应反应。 如：受伤失血后，多能造血干细胞能以 2 个子代细胞都是定向祖细胞的对称分裂方 式迅速生成足量的红细胞补充。表皮干细胞 也可以通过此方式应付突发的皮肤受损等。 五、干细胞的一般特性 1、发育的全能性或多能性； 3、长的生命周期及相对慢的增殖速度； 4、是“所有细胞的母亲”、再生能力强； 5、易操作性。 2、无限的自我更新能力； 第二节 造血多能干细胞和骨髓间充质干细胞 1、造血多能干细胞 (1)造血干细胞的分化： 成体哺乳动物的血细胞都来源于骨髓 中的造血干细胞( HSC)。在发育的很早阶 段，部分HSC成为2种造血系统的前体细胞： 淋巴样干细胞(CLP)和髓样干细胞(CMP)。 (2)造血干细胞的分离：运用流式细胞仪、磁 性分选技术能从骨髓、外周血、胎肝中分 离到足够数量的早期造血干细胞。 (3)造血干细胞的用途：治疗血液病。 外周血干细胞和脐血干细胞移植的 安全性较好，有望取代骨髓移植。 2、骨髓间充质干细胞(MSC) (1)MSC具有向中胚层和神经外胚层来源的多种 组织细胞分化的能力。 (3)MSC的作用 A、植入体内的 MSC，可在多种造血以外的组 织，如肺、肝、骨、软骨、皮肤等处定位 和分化，形成相应的细胞表型。 (2)MSC 易分离，体外连续培养和冷冻保存不 改变分化潜能。 D、对于中胚层和神经外胚层来源的组织受损 伤和退行性疾病的治疗前景很大。 C、MSC可向受损肌肉组织处迁移并参与新肌 肉的产生。 E、易于外源基因的导入和表达，可将细胞治 疗和基因治疗有机地结合在一起。 B、MSC移植后不发生免疫排斥反应或反应程 度较低，好控制。 第三节 动物克隆的理论基础与方法 一、克隆的含义 1、克隆是“clone”的音译，原意是用于扦插 的枝条，即无性繁殖。 2、目前，在生物学领域“克隆”有分子、细胞 和生物个体3个不同层次的含义。 (1)在分子水平：DNA 克隆(分子克隆)是指将 某一特定 DNA