第1节克隆操作中使用的工具酶1.pptVIP

第一节 基因操作工具酶 第二节 核酸的分离纯化第三节 聚合酶链式反应（PCR）第四节 凝胶电泳系统第五节 核酸的分子杂交第六节 载体系统;第一节 基因操作工具酶;;主要内容;;1 限制性核酸内切酶;核酸酶（Nuclease）： 通过切割相邻两个核苷酸残基间磷酸二酯键，导致核酸分子多核苷酸链水解断裂的蛋白酶。 （1）按作用对象分: DNAase RNAase （2）按断裂核酸分子不同方式分： Endonuclease Exonuclease;限制性内切核酸酶（restriction endonuclease): 指一类能识别双??DNA分子中特定核苷酸序列，并在识别序列内或附近特异切割双链DNA的核酸内切酶。;1.2 命 名;1.3 分 类;1.3.1 Ⅰ型限制性内切酶;1.3.2 Ⅲ型限制性内切酶;1.3.3 Ⅱ型限制性内切酶;(1) 基本特性;;(2) 同功异源酶(isoschizomer) ;(3) 同尾酶（isocaudamer);1.4 活性及影响因素;(3) 影响因素;2 DNA连接酶;2.1 定义及功能;OH P; 两类: ◆T4 DNA连接酶(ATP提供能量） ◆ 大肠杆菌DNA连接酶（NAD+提供能量） ;;1)不能催化两单链DNA分子连接； 2)只