固氮芽孢杆菌.pptVIP

四川农业大学本科专业技能提升计划 —之第二届生物工程专业实验设计与技能竞赛 固氮芽孢杆菌的分离与鉴定 组长：唐裕佳（生物工程201002） 成员：马 越（生物工程201101） 蒋亚明（生物工程201102） 主要内容 研究背景 1 试验流程 2 可行性分析 3 4 预期结果 研究背景-饲用芽孢杆菌的研究 农业部批准饲用的芽孢杆菌有： 枯草芽孢杆菌 纳豆芽孢杆菌 蜡样芽孢杆菌 凝结芽孢杆菌 缓慢芽孢杆菌 地衣芽孢杆菌 短小芽孢杆菌 根据国内外的研究表明： 增强机体特异性免疫 拮抗病原微生物 改善肠道常住菌群 增强肠道功能 治疗仔畜肠道应激 提高生长性能  研究背景-固氮芽孢杆菌的研究 已证实能固氮的芽孢杆菌有： 多粘芽孢杆菌、 浸麻芽孢杆菌、 固氮芽孢杆菌、 环状芽孢杆菌、 蜡状芽孢杆菌、 丁酸芽孢杆菌、 短小芽孢杆菌、 巨大芽孢杆菌、 球形芽孢杆菌、 短芽孢杆菌、 枯草芽孢杆菌、 地衣芽孢杆菌 研究背景-菌体蛋白饲料的研究 菌体蛋白的优势 单细胞蛋白含量约为微生物干重的40%~80% 其蛋白质量较植物蛋白更高 与动物蛋白相近 脂肪含量更低 动物机体极易吸收利用 生产上：本低 生产效率高 工业化生产 易诱变得到更优良的菌株 研究背景-菜籽粕的发酵 众多的菜籽粕脱毒处理方法中，微生物发酵法因其操作简单，脱毒效果明显等优点逐渐成为研究的热点。 胡永娜等的研究表明芽孢杆菌在发酵过程中的蛋白酶活性最高能很好的降解菜籽粕中的粗蛋白, 吴东等的研究表明与普通菜籽粕相比发酵菜籽粕中一些主要营养物质都得到了提高。 菜籽粕的成分粗蛋白、 粗脂肪、钙、有毒物质（硫苷等抗营养因子以及硫苷酶解产物异硫氰酸酯、恶唑烷硫酮） 试验流程 初筛 样品处理 富集培养（3次） 分离 纯化保存 直到分离出固氮菌 复筛 高效固氮菌的筛选 安全性评价 菌体蛋白含量的测定 菌种的鉴定 （未通过则重新进入初筛） 细菌的鉴定 芽孢的形状 接触酶 硫酸盐还原 硝酸盐还原 培养是否需要2%NaCl 产乳酸 16SrDNA测序比对 固氮酶基因nifH 的测序比对 生化鉴定 分子鉴定 预期结果 筛选到一株高效固氮芽孢杆菌用于菜籽粕的发酵，达到资源合理利用的预期目标 可行性分析 试验样品可就地取材 安全性评价所需动物为小鼠容易购得饲养简单 发酵工程实验室和基础医学系解剖组胚实验室能提供满足本试验所需的仪器设备 敬请批评指正！ 谢谢