外源基因在宿主细胞中表达1.docVIP

外源基因在宿主细胞中的高效表达- I影响外源基因表达的因素 有效的转录起始 主要的限速步骤 选择强的可调控的启动子及相关的调控序列，是组建一个高效表达载体的首要问题 启动子:位于结构基因5’端上游区的DNA序列,活化RNA聚合酶 启动子的特征: 序列特异性、方向性、位置特性、种属特异性 举例说明原核生物的启动子和真核生物的启动子。 启动子根据作用方式及功能分类： 组成型启动子(constitutive promoter) ：在个体的任何细胞中均有表达活性的启动子 诱导型启动子 组织特异型启动子 最理想的强的可调控的启动子应该是：在发酵的早期阶段表达载体的启动子被紧紧地阻遏，这样可以避免出现表达载体不稳定，细胞生长缓慢或者由于产物表达而引起细胞死亡等问题。当细胞达到一定的密度，通过多种诱导使阻遏物失活，RNA聚合酶快速启动转录。 原核细胞的启动子：lac, trp, tac, phoA, lPL , lPＲ都是这一类启动子（诱导型启动子，inducible promoters)）。 T7噬菌体启动子则是另一种类型的启动子，即组成型启动子（constitutive promoters）。Ｔ７噬菌体启动子只为Ｔ７噬菌体的ＲＮＡ聚合酶所识别，而被Ｔ７RNA聚合酶所起始的转录非常活跃，使得由宿主细胞的RNA聚合酶所进行的转录根本无法与之竞争，这样使细胞中