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第十四章 电泳分离技术 广州大学生命科学学院 柯德森 电泳技术原理 带正电荷的生物分子在电场作用下向阴极移动,带负电荷的生物分子在电场作用下向阳极移动 泳动度(迁移率):带电质点在单位强度电场下的泳动速度 即:U=V/E=(d/t)/(V/L) 不同分子在同一电场中可能具有不同的泳动度 泳动度(迁移率)取决于带电质点的性质，即质点所带的净电荷的量、质点的大小和质点的形状。 同时决定于：电泳介质阻力、溶液黏度. 两性的生物大分子所带电荷的性质和数量由其等电点及溶液环境(pH值)所决定; 凝胶电泳包括：琼脂凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳 琼脂凝胶电泳：常用pH6-9;离子强度0.02-0.05;硼酸盐缓冲液和巴比妥缓冲液；浓度常用1%-1.5% 琼脂凝胶电泳的优点：？？ 近似自由界面 液固相间无明显界面，电泳速度快 不吸收紫外线，可直接用紫外检测仪测定 容易染色易洗脱 聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE） PAGE是根据被分离物质所带电荷的多少及其分子大小、形状不同，在电场作用下产生不同的移动速度而分离。它具有电泳和分子筛双重作用 一些概念 凝胶浓度和交联度 不连续与连续胶 变性胶及非变性胶 凝胶的浓度和交联度 凝胶浓度：T（Acr和Bis总浓度） =(a+b)/m.100% 交联百分比：C（交联剂的百分比） =b/(a+b).100% a:Acr浓度；b: Bis浓度；m:缓冲液体