实验八 聚炳烯凝胶电泳教材课程.pptVIP

血清蛋白的分离 聚丙烯酰胺凝胶电泳法 一、实验目的 学习聚丙烯酰胺凝胶电泳原理 2) 掌握聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳的操作技术 二. 基本原理 (一) 电泳 电泳: 带电颗粒在电场的作用下,向着与其电性相反的电极移动的现象. (二) 聚丙烯酰胺凝胶电泳 用丙烯酰胺(Acr)单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺(Bis)在催化剂作用下聚合成的多孔介质.以此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称PAGE)。 1. 聚丙烯酰胺凝胶有下列特性 (1) 凝胶有弹性，机械性能好；几乎无吸附和电渗作用，样品分离重复性好； (2)样品不易扩散，且用量少，其灵敏度较高。 (3)凝胶孔径可调节，通过改变单体及交联剂的浓度调节凝胶的孔径； (4)分辨率高，尤其在不连续凝胶电泳中，集浓缩、分子筛和电荷效应为一体。因而较醋酸纤维薄膜电泳、琼脂糖电泳等有更高的分辨率。 3 凝胶聚合催化体系 （1）光催化：核黄素 （2）化学催化：AP-TEMED 催化体系 Bis将单体长链间连成网状结构 化学聚合的凝胶孔径较小，常用于制备分离胶，重复性好。聚合反应受各种因素的影响： ? 催化剂和加速剂的浓度 ? pH 碱性条件 ? 温度 ? 分子氧 ? 杂质 4.聚丙烯酰胺凝胶种类 (1) 连续系统与不连续系统两大类 不连续系统: