* 实验二、RNA的提取和核酸的颜色反应 RNA + 苔黑酚 实验目的 1、学习用浓盐法从酵母中提取RNA。 2、掌握用等电点法沉淀RNA。 3、观察核酸的颜色反应,了解核酸定性和定量 测定的原理。 4、熟练掌握普通离心机的使用方法。 实验原理 1、什么是RNA? RNA(核糖核酸)是一种多聚核苷酸 核糖核酸 核苷酸 磷酸 核苷 戊糖 (核糖) 碱基 RNA的结构 RNA和DNA(脱氧核糖核酸)核苷酸结构的主要差异 DNA RNA RNA在生命活动中发挥多种重要功能 mRNA tRNA rRNA Small RNA and micro RNA 细胞中RNA的种类 信使RNA 转运RNA 核糖体RNA 小RNA 2、怎样提取RNA? 提取RNA的方法 工业 实验室 稀碱法 浓盐法 自溶法 CTAB 法 Trizol 法 SDS 法 浓盐法提取RNA的原理和过程 1、利用高浓度的盐(10%的NaCl)在90-100℃下,改变细胞膜的通透性,释放RNA。 2、利用离心技术,分离RNA溶液和菌体残渣。 3、根据核酸在等电点溶解度最小的性质,将溶液在低温下调pH至2.0到2.5,析出RNA。 什么是等电点?为什么RNA在等电点溶解度最小? 问题: H+ RNA是两性分子 负电基团 正电基团 3、怎样检测RNA? O OH HO
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