梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验(TPPA)及其在梅毒检测中的应用
1 梅毒简介
血清或血浆1ml,标本应无溶血,无脂血,无微生物污染。不满足上述要求的标本拒收,标本的采集应使用清洁,无菌的一次性的干燥管。
标本用量最少50ul,七天内检测的标本应在2-8℃保存,贮存在-20℃可保存4W,同时避免反复冻融血清
梅毒抗体检测是采用抗原抗体凝集反应中的凝集反应。其原理如下:将梅毒 (Nichols 株)的精制菌体成分包被在人载体明胶粒子上。这种致敏粒子和样品中的梅毒螺旋体(TP)抗体进行反应发生凝集,产生粒子凝集反应(PA),并且可用来测定抗体效价
TPPA检测技术
实验步骤
5、混匀,加盖,孵育2个小时,判读结果
实验操作中的注意事项
试剂批号不同不可混用,试剂不可冷冻
最好在白色湿布上加样,防止静电,易于观察
致敏粒子与未致敏粒子使用前必须混匀,加完样后要充分震荡,注意不要溢出
结果观察完毕前不要移动加样板
1.观察加未致敏颗粒的第3孔,不出现凝集为有效试验。
2. 观察凝集反应强度:分级如下。
4+:颗粒光滑覆盖整个孔底,有时边缘有折叠。
3+: 颗粒光滑覆盖大部分孔底。
2+:颗粒光滑集聚覆盖孔底,周围有一颗粒环。
1+: 颗粒光滑集聚覆盖孔底,周围有一明显颗粒环。 ±:颗粒沉集孔底,中央形成一小点。 一:颗粒紧密沉积孔底中央。
结果判读条件
结果判读
对照孔结果无论是阴性还是阳性,只要致敏粒子是阴性,就出阴性结果
RPR结果(前带现象)
易出现在二期梅毒
临床结果讨论
我们实验室TRUST+TPPA常出现以下4种情况:
1、TRUST-,TPPA- 可基本排除梅毒。极早期梅毒(无任何抗梅毒抗体产生)。极晚期梅毒。艾滋病病人合并梅毒感染。
2、TRUST+,TPPA+ 现正梅毒,应考虑治疗。
3、TRUST-,TPPA+ 极早期梅毒、晚期梅毒、治愈的早期梅毒(应询问病人是否有既往的梅毒感染和治疗史;若病人否认有既往史)。解释漏检
4、TRUST+,TPPA- TRUST 假阳性
技术性:
标本的污染
溶血
操作失误
生物学假阳性
某些疾病:结核、疟疾、肝病、红斑狼疮、流感、肺炎、类风湿性关节炎、风湿性心脏病、风疹、系统性硬化症等,疾病发展过程中释放心磷脂到血液中假阳性。
生理机能发生变化:少数孕妇也可发生生物学假阳性。
服用免疫球蛋白类药物
梅毒血清试验假阳性因素:
标本采集注意事项
操作过程注意事项
结果判定注意事项
本期小结
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