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第七章 分子发光分析法 §1 荧光分析法 一、概述 灵敏度高，检出限比分光光度法低2~4个数量级。选择性也好。 适用范围较小，主要用于生物物质。 二、基本原理 （一）荧光和磷光的产生 荧光与磷光的比较： （1）荧光是由激发单重态最低振动能层至基态各振动能层间跃迁产生的; 磷光是由激发三重态的最低振动能层至基态各振动能层间跃迁产生的. 激发光谱曲线 （三）荧光效率及其影响因素 1、荧光效率 2、荧光与分子结构的关系 物质只有能吸收紫外可见光，才可能发荧光。 分子的刚性平面结构有利于荧光的产生。 3.环境因素对荧光的影响 1、溶剂的极性：电子激发态比基态有更大的极性。溶剂的极性增强，对激发态会产生更大的稳定作用，使物质的荧光波长红移，荧光强度增大。 5、表面活性剂：使荧光物质处于更有序的胶束微环境中，对处于激发单重态的荧光物质分子有保护作用，减小非辐射跃迁的概率，提高荧光效率。 （三）荧光强度与溶液浓度的关系 三、荧光分析仪 I0 四、荧光分析法的应用 （一）无机化合物---金属离子 与芳香族化合物形成络合物，使分子的平面刚性结构增大，原来不发光或发光较弱的化合物转变为强荧光化合物。 无机离子与发荧光的物质反应形成无荧光物质。根据荧光减弱的程度进行测定。 §2 磷光分析法 一、原理 三 磷光分析仪器 §3化学发光分析法 化学反应的化学能