《_微生物发酵制药》公开课件（设计）.pptVIP

* 机械消泡 * 消泡剂的使用 * 发酵终点的判断 * 经济原则 在最大生产率时，终止发酵 发酵总生产周期最短 * 产品质量原则 * 生物、物理、化学指标 * 发酵培养的操作方式 * * * * * * 微生物发酵制药的应用 抗生素 维生素及辅酶类 其他类 蛋白质、多肽、氨基酸及核酸类 对抗细菌感染性药物的需求使发酵技术奇迹般成功。 * * * * * 灭菌方法 化学灭菌 * 物理灭菌 * 培养基灭菌的操作方式 * 分批操作的灭菌过程 冷却降温：依次关闭排气、进气阀。罐压低于空气压力后，通入无菌空气，夹套通冷却水降温 通入蒸汽，加热升温：空气管、夹套通入蒸汽，升温至70℃，取样管、放料管通入蒸汽 维持保温：120 ℃，罐压0.1MPa，排气。调节进气和排气量，维持30min。 * 连续灭菌操作 * 连续灭菌灭菌过程 * 连续灭菌的特点 * 三、发酵工艺条件的确定及主要控制参数 * 检测仪器和主要参数 * 生物学检测的主要参数和控制 * * * * 物理参数的检测与控制 3.发酵过程的主要控制参数与检测 * 对一种微生物来说： 超过它的最高生长温度可杀死它 采用它的最适生长温度可培养它 低于它的最低生长温度可保存它 * 温度的选择原则 * 温度的控制方式 * 压力的检测与控制 * 搅拌的检测与控制 * 化学参数的检测与控制 基质浓度 pH 溶解氧 尾气 * 基质浓度的检测与控制 * pH的检测与控制 * 环境中微生物可生存的pH值范围在1～11之间， 具体到每种微生物而言： 细菌最适pH值在6.5～7.5之间。 放线菌最适pH值在7.5～8之间。 酵母菌、霉菌适合于pH5～6的酸性环境。 因为微生物在生长过程中的代谢产物可以改变环境中的pH值，所以在培养微生物时，培养基不但要调节pH值，还要选择适合pH值的缓冲。 如磷酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液等。 * 控制pH的策略 * 通气条件对微生物生长的影响 好氧性微生物，在培养时必须保证通 气条件良好。实验室中通常采用震荡培养 或摇瓶培养，发酵生产中多采用通入无菌 空气和搅拌等方法供氧。 厌氧性微生物，在培养时必须隔绝空 气，通常采取的措施有：用焦性没食子酸 吸收氧气、抽真空、加盖覆物以及密闭容 器等，或采用厌氧培养箱、发酵罐等。 * 溶解氧的检测与控制 标准：不影响呼吸或产物合成的最低溶解氧浓度 供氧必需大于或等于溶氧，才能使发酵正常进行 * 影响供氧的因素 增加氧分压：通入富氧空气，增加溶氧浓度， 不经济 提高罐压：增加CO2浓度，对设备要求高 改变通气速率 降低发酵温度 改变培养基粘度 中间补水 添加表面活性剂 间接策略：控制菌体浓度 * 废气检测与控制 * 泡沫的检测与控制 * 泡沫形成的原因及其影响 * 泡沫控制 培养基调整与工艺控制： 少加或缓加起沫基质； 改变发酵条件，如pH、升高温度、减少通气、 降低搅拌速率。 改变发酵工艺，如分批投料。 加入消泡剂 机械消泡 * 化学消泡 * 氨水、铵盐和硝酸盐等。铵盐比硝酸盐更快利用。 工业应用：主要氮源和辅助氮源；调节pH值 生理酸性物质：代谢后能产生酸性残留物质，如（NH4)2SO4利用后，产生硫酸 生理碱性物质：代谢后能产生碱性残留物质。如NaNO3利用后，产生氢氧化钠。 无机氮源 * 概念：组成生理活性物质或具有生理调节作用的矿物质。 作用方式：低浓度起促进作用，高浓度起抑制作用 种类：P、S、K、Na、Mg、 Ca 常常添加Fe 、Zn 、Cu 、Mo、Co、Mn、Cl，一般不加 无机盐与微量元素 * 水 菌体细胞的主要成分 营养传递的介质 良好导体，调节细胞生长环境温度 培养基的主要成分。 * 概念： 维持微生物生长所必需的微量有机物，不起碳源和氮源作用。 种类： 维生素、氨基酸、嘌呤或嘧啶及其衍生物、脂肪酸等。 天然成分中含有：一般无需添加。 生长因子（growth factor） * 概念： 加入到发酵培养基中的某些化合物，被直接结合到目标产物分子中，而自身的结构无多大变化。 使用： 添加前体是提高抗生素产量的重要措施 多次少量添加 前体（precurtsor） * 概念： 促进产物生成的物质，但不是营养物，也不是前体的一类化合物。 种类： 氯化物有利于灰黄霉素、金霉素合成。 表面活性剂吐温、清洗剂，脂溶性小分子化合物等，起诱导作用。 促进剂（accelerant） * 概念：降低泡沫的液膜强度和表面粘度，使泡沫破裂的化合物。 种类：油脂类、酯类、硅油及聚氧乙烯－聚氧丙烯甘油醚。 天然动植物油脂类、高分子化合物（高碳醇脂肪酸和酯类、聚醚类、硅酮类） 作用：消除泡沫