酸乳中酵母菌的测定.pptVIP

酸乳中酵母菌的测定 THE END * * * * * 一、仪器、材料、培养基、试剂 冰箱：2℃～5℃ 恒温培养箱： 28℃±1℃ 均质器 恒温振荡器 显微镜：10×～100× 电子天平：感量0.1g 无菌锥形瓶:容量500mL、250mL 无菌广口瓶：500mL 无菌吸管：1mL(具0.01mL刻度)和10mL(具0.1mL刻度) 无菌平皿：直径90 mm 无菌试管: 10 mm×75 mm 无菌牛皮纸袋 塑料袋 马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基 孟加拉红培养基。 二、操作步骤 1. 样品的稀释 ① 以无菌吸管吸取25mL样品至盛有225mL无菌蒸馏水的锥形瓶（可在瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10的样品匀液。 ②取1mL1:10稀释液注入含有9mL无菌水的试管中, 另换一支1mL无菌吸管反复吹吸,此液为1:100稀释液。 ③制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次1mL无菌吸管。 二、操作步骤 ④根据对样品污染状况的估计，选择2个～3个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10倍递增稀释的同时，每个稀释度分别吸取1mL样品匀液于2个无菌平皿内。同时分别取1mL样品稀释液加入2个无菌平皿作空白对照。 ⑤及时将15mL～20mL冷却至46℃的马铃薯-葡萄糖-琼脂或孟加拉红培养基(可放置于46℃±1℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。 二、操作步骤 2．培养 待琼脂凝固后，将平板倒置，28℃±1℃培养5d，观察并记录。 3．菌落计数 肉眼观察，必要时可用放大镜，记录各稀释倍数和相应的霉菌和酵母数。以菌落形成单位（CFU）表示。 选取菌落数在10 CFU～150 CFU的平板，根据菌落形态分别计数霉菌和酵母数。霉菌蔓延生长覆盖整个平板的可记录为多不可计。菌落数应采用两个平板的平均数。 二、操作步骤 4.结果与报告 计算两个平板的菌落数的平均值，在将平均值乘以相应稀释倍数计算。 *