中国高新技术产业导报道客巴巴2004年2月13日教学内容.pptVIP

中国高新技术产业导报 2004年2月13日 清华大学罗国安教授负责的中药指纹图谱技术引起业界高度重视，被认为是中药产业革命的发轫。他运用现代指纹图谱分析技术将中药的物质组成表征出来，发现全新的中药研发模式。作为分析方法提供者的罗国安先生，主要研究毛细管电泳和质谱联用，成功运用于中药复方化学成分的分离及检测。 毛细管电泳 李承碑毛细管电泳的历史 国外 最早是由瑞典科学家Hjerten 提出的。从1974年到1986年经历了极其迅速的发展。 国内 最早是由竺安教授在1980年提出来的，他先后在中国科学院化学研究所和浙江大学建立了两个研究组。1992年CE开始受到国内广泛重视，发展很快。 毛细管电泳的原理 一种基于“不同组分在溶液中电泳迁移速度不同”的原理，利用电解槽和与之相连的毛细管对样品组成进行分离和检测的化学分析技术。 毛细管电泳测定DNA序列 自人类基因组计划提出以来，DNA的快速测序一直是研究热门课题。到目前为止，新的高速测序方法有两类，一是基于DNA杂交的探针阵列或DNA芯片技术，另一种就是毛细管电泳。 第一步：提取目标DNA,酶切成合适长度，克隆或扩增得纯的单链DNA； 第二步：在单链DNA中加入5’—荧光标记引物、DNA聚合酶和dNTP形成链延长混合； 第三步：取4份混合物，分别加入ddATP,ddGTP,ddCTP,ddTTP进行竞争复制； 第四步：用单管或四管CE-LIF分析4种测序产物，得到A,G,C,T四个谱图； 第五步：将图谱重叠，从小到大读出序列； 第六步：根据碱基互补翻译出原序列； 第七步：扣除引物带来的顺序，得到DNA序列。