藤黄生孢链霉菌nrrl2401遗传操作系统和基因文库的构建.pdfVIP

微生物学报 Acta Microbiologica Sinica 2016, 56(2): 209-218 /actamicrocn DOI: 10.13343/ki.wsxb Research Paper 研究报告 藤黄生孢链霉菌NRRL 2401遗传操作系统和基因文库的构建 * 成雪晴，朱涛，邓子新，由德林 上海交通大学生命科学技术学院，微生物代谢国家重点实验室，上海 200240 摘要： 【目的】建立藤黄生孢链霉菌NRRL 2401 的遗传操作系统和基因文库，以便筛选次级代谢产物生 物合成基因。【方法】利用大肠杆菌和链霉菌的属间接合转移的方法，以整合型载体pPM927 、 pSET152 和复制型载体pJTU1278构建链霉菌遗传操作系统。以pCClFOSTM 载体，大肠杆菌EPl300TM - R T1 为宿主菌构建Fosmid文库。随后，设计引物，利用“板池–行池–单克隆”的三级