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技能点2：维生素Ｃ含量的测定 承担院校 宁波职业技术学院 职业教育应用化工技术专业教学资源库《化工产品检验》课程 * 维生素Ｃ含量的测定 1．能力目标： （1）掌握紫外-可见分光光度计法对维生素C含量进行测定； （2）能对仪器进行熟练操作及使用 （3）能对仪器进行保养和简单的维护； （4）能分析所测的数据；并给出结果 * 操作规程(使用方法) 注意：仪器面板的测量模式应按要求选择 操作步骤 开机预热 选择光源 选择波长 调透射比为零 调透射比为100% 样品测定 * 1 仪器与试剂 ???? UV-725紫外分光光度计，VitC对照品及维C银翘片，硫酸溶液（pH=6）。 * 2 实验操作 2.1 标准曲线的绘制 精密称取VitC对照品0.05g溶于100ml硫酸溶液，再稀释成一系列不同浓度的对照品溶液（0～14μg/ml），分别测出其吸光度。然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。该曲线是经过原点的一条直线，可求出该曲线的斜率。 ??? * 2.2 样品测定 取维C银翘片20片，精密称量，研细，精密称出适量（相当于VitC50mg），置于100ml量瓶中，加硫酸溶液溶解并稀释至刻度，滤过，精密量取续滤液2ml置于另一100ml量瓶中，加硫酸溶液稀释至刻度，测出其吸光度A 样 。由标准曲线查出样品的浓度C 样品。 * 设计用紫外分光光度法测定维生素C含量的方案。 并且测试含量 配制一定浓度的维生素C溶液 ------ 在波长220—320nm内分别测定其吸光度值-----以测定波长为横坐标、吸光度值为纵坐标绘制吸收曲线---确定最大吸收波长 * 注意： 1、维生素C的还原能力强而易被氧化，特别是在碱性溶液中易被氧化。另外在碱性溶液或强酸性溶液中还能进一步发生水解。因此，选择硫酸溶液使成弱酸性。 2、测定时溶液pH的选择:维生素C的紫外最大吸收波长与溶液的pH值有着密切关系。在pH=2.0时，溶液的最大吸收波长在245nm;在pH=12时，溶液的最大吸收波长在300nm;在pH=5～10范围时，溶液的最大吸收波长在267nm，况且在pH=6.0时吸收度值最大。所以，选择测定溶液的pH=6.0。 ??? 1 1
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