脂肪酸的提取.docVIP

提取方法主要有Bligh—Dyer法及Folch法。前者适用于大量脂类的提取，提取率在 95％甚至更高；后者适用于少量组织内脂的提取，提取率在95％～99％。我们在实验中 常用Folch法。称取1 g待测样品，加入10 ml甲醇，加少量酸洗砂研磨，匀浆1 min，然后 加入20 ml氯仿，继续匀浆2 min，过滤，滤渣中加入氯仿一甲醇混合液(2：1 V／V)30 ml 并研磨，过滤。先用20 ml氯仿及10 ml甲醇洗涤滤渣，合并滤液，然后加入全部滤液体 积1／4的水，振荡，静置分层，将上层及界面处固体物吸除去，然后加入甲醇一水混合物 (1：1)，体积为下层体积的1／4，振荡，静置分层，吸掉上层液体及界面物，重复洗涤两次。 然后将有机相减压蒸干，配制成氯仿溶液，一20℃下保存。注意：在分析植物组织中的脂 质时，需要用加热法使植物中的脂酶失活。 1．皂化、酯化 取约4 mg的总脂按Carreau—Dubacq法，加入约1 ml 1．5％的NaOH／MeOH(或 1％Na／MeOH)溶液，在55。C水浴中加热30 min，然后加入1．5 ml HCl／MeOH，水浴加 热30 min，加0．5 ml左右的蒸馏水，然后用4 ml／Eg烷萃取，吸取正己烷层，重复两次。 然后将萃取液减压蒸干，加入0．3 ml氯仿。 Modified Folch procedure Homogenised