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- 2019-10-27 发布于河北
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以水稻幼苗为实验材料验证硝酸还原酶是一种诱导酶
马祥荣 15生物科学C 1543204000225
一、实验目的:
让学生理解什么是诱导酶?掌握植物硝酸还原酶(NR)活性测定的原理和技术方法,进一步了解NR在植物氮素同化过程中的作用。
二、实验仪器和试剂:
1.分光光度计、比色皿、电子天平、保温箱、三角瓶、移液管、试管等。
2. 3mol·L-1HAc溶液、磺胺、a-萘胺、蒸馏水、硝酸盐等
三、实验材料:
已经长成的没有被硝酸盐处理过的水稻幼苗。
四、实验方法和步骤:
(一)先把幼苗分为实验组和对照组,以以下步骤对实验组和对照组的水稻幼苗进行硝酸还原酶活性的测定,步骤如下:
1.对实验组幼苗用硝酸盐溶液进行处理,处理后,再将叶片上的残留硝酸盐洗去;对照组用蒸馏水水作对照处理。
2.分别取清洗过的幼苗叶子,然后吸干水分。在天平上称取等重的叶子两份,每份约0.3-0.4g,分别置于含有下列溶液的50mL三角瓶中:(1)0.1mol/L磷酸缓冲液5mL+蒸馏水5mL;(2)0.1mol/L磷酸缓冲液5mL+0.2mol/LKNO35mL。
3.将三角烧瓶置于真空干燥器中,接上真空泵抽气,放气体后叶片沉入溶液中。
4.将三角烧瓶置于30摄氏度恒温箱中保温30min,然后分别吸取反应液1mL于试管,以测定NO2-含量。
5. NO2-含量测定:在取好反应液的试管中加入磺胺
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