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常用的DNA限制性内切酶的专一性 嘧啶的分解 11.3 核苷酸的生物合成 20世纪50年代,利用同位素标记,以鸽肝为材料阐明嘌呤核苷酸的生物合成途径。一般认为,所有生物合成嘌呤的过程基本相同。 生物中合成嘌呤核苷酸的过程:先合成次黄嘌呤核苷酸(IMP),再由IMP生成AMP和GMP。 IMP的生物合成 IMP转变为GMP和AMP * * 11 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 1、核酸酶的类别和特点(一般介绍) 2、核苷酸的生物合成(重点) 3、核苷酸分解代谢(重点) 核苷酸的分解代谢 核苷酸的生物合成 小 结 核酸的酶促降解 概 述 本 章 重 点 食物中核酸的吸收利用: 食物中的核酸通常以核蛋白的形式存在。核蛋白在胃中受胃酸作用,分解为核酸和蛋白质。 核酸在小肠中由一系列的核酸酶催化水解,最后水解产生磷酸、戊糖和含氮碱基,被消化吸收利用 同时,在生物体内,各种核苷酸还可以从头合成。 因此,对于健康人来说,只要膳食结构合理,一般是不存在核酸缺乏症的。 细胞内核酸的酶促降解: 对外源DNA或RNA进行识别和降解; 自身遗传物质的代谢。 概 述 11 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 核苷酸的分解代谢 核苷酸的生物合成 小 结 概 述 核酸的酶促降解 核酸酶(磷酸二酯酶) 核苷酸酶(磷酸单酯酶) 核苷水解酶 (或核苷磷酸化酶) 核酸 核苷酸 核苷 磷酸 核蛋白 胃 蛋白质 进一步降解 小肠 小肠 小肠 嘌呤 或嘧啶 戊糖 (戊糖-1-磷酸)) 食物中核酸的吸收利用示意图 概 述 11 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 核苷酸的分解代谢 核苷酸的生物合成 小 结 概 述 核酸的酶促降解 概 述 ③ ② 11 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 核苷酸的分解代谢 核苷酸的生物合成 小 结 概 述 核酸的酶促降解 概 述 11 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 核苷酸的分解代谢 核苷酸的生物合成 小 结 概 述 核酸的酶促降解 11.1.1 核酸酶 (1)按底物专一性分 核糖核酸酶(RNase) 脱氧核糖核酸酶(DNase) 非特异性核酸酶 (2)按切割位点分 核酸内切酶 核酸外切酶 (3)按作用键分 水解3’-磷酸酯键(生成5’-磷酸核苷) 水解5’-磷酸酯键(生成3’-磷酸核苷) 一、分类: 11.1 核酸的酶促降解 核酸的酶促降解 核酸酶 核苷酸的分解代谢 限制性内切酶 核苷酸的生物合成 小 结 概 述 11.1.1 核酸酶 二、外切核酸酶:外切核酸酶是非特异性的磷酸二酯酶 外切核酸酶对核酸(DNA或RNA)的水解位点示意图 OH 5′ p p p p B p p p p B B B B B B B 牛脾磷酸二酯酶( 5′端外切5得3), 主要得 3′-核苷酸。 蛇毒磷酸二酯酶( 3′端外切3得5), 主要得 5′-核苷酸。 3′ 3′ 5′ 11.1 核酸的酶促降解 核酸的酶促降解 核酸酶 核苷酸的分解代谢 限制性内切酶 核苷酸的生物合成 小 结 概 述 11.1.1 核酸酶 三、内切核酸酶:内切核酸酶是特异性的磷酸二酯酶 内切核酸酶对RNA的水解位点示意图 OH RNase T1 Pu : 嘌呤 purine Py:嘧啶pyrimidine 5′ p p p p Py Pu Py Py p p p G C C U p p p G A 3′ RNase I (牛胰核酸酶) RNase I RNase T1 (曲霉中分离) 3′ 5′ 11.1 核酸的酶促降解 核酸的酶促降解 核酸酶 核苷酸的分解代谢 限制性内切酶 核苷酸的生物合成 小 结 概 述 四、脱氧核糖核酸酶: 作用方式:内切酶(切断单链或双链) 外切酶(5′→3′切割或3′→5′切割) 专一性:专一水解DNA 目前还没有发现碱基专一性,但有序列专一性,即限制性内切酶。 11.1.1 核酸酶 11.1 核酸的酶促降解 核酸的酶促降解 核酸酶 核苷酸的分解代谢 限制性内切酶 核苷酸的生物合成 小 结 概 述 11.1.2 限制性内切酶 1979年,W. Arber, H. Smith和D. Nathans等发现某些细菌细胞内存在一类能识别一定序列并水解外源双链DNA的内切核酸酶,即限制性内切酶。 概念:具有极高的专一性,能识别DNA双螺旋中4-8个碱基对所组成的特异的回文序列,并在此序列的某位点水解DNA双螺旋链,产生粘性末端或平末端,这类酶称为限制性内切酶(ristriction endonuclease)。 11.1 核酸的酶促降解 核酸的酶促降
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