在结直肠癌组织和细胞中表达及其调控结肠癌细胞中表达的机制.pdfVIP

中国肿瘤生物治疗杂志 ·58 · Chin J Cancer Biother, Jan. 2019, Vol. 26, No. 1 DOI：：10.3872/j.issn.1007-385x.2019.01.010 ∙临床研究∙ lncRNA SNHG16 在结直肠癌组织和细胞中表达及其调控结肠癌细胞中 GPAM 表达的机制 1 2 3 1 周云松 ，温小辉 ，张琦 ，寇炜 （1. 西北民族大学医学院临床技能中心，甘肃 兰州 730030 ；2. 甘肃中医药大 学临床学院，甘肃 兰州 730000 ；3. 甘肃省人民医院 内分泌科，甘肃 兰州 730000） [摘 要] 目的：探讨长链非编码RNA （long non-coding RNA ，lncRNA）SNHG16在结直肠癌（colorectal cancer ，CRC）组织和细 胞中的表达及其通过海绵吸附miR- 128-3p 调控结肠癌细胞线粒体甘油3 磷酸酰基转移酶基因（mitochondrial glycerol-3-phos- phate acyltransferase ，GPAM）表达的分子机制。方法：收集2014 年1 月至2017 年1 月甘肃省人民医院肛肠科手术切除的60 例 CRC 患者的癌及癌旁组织标本，以及结直肠癌细胞系SW480 、SW620 、HCT 116、Caco-2 、DLD- 1、HT29 和结肠上皮细胞CCD841 ， 用qPCR 法检测CRC 组织和细胞系中SNHG16 的表达，分析SNHG16表达与CRC 患者临床病例特征的关系。分别用miR- 128-3p 模拟物、miR- 128-3p 抑制剂、SNHG16敲降载体转染SW480 细胞后，用qPCR 法检测细胞中miR- 128-3p 及SNHG16 mRNA 的表 达，用Western blotting 法检测GPAM 蛋白的表达，用CCK-8 法、克隆形成实验及细胞凋亡实验、Transwell 小室法检测细胞的增殖、 凋亡及侵袭。用双荧光素酶报告基因法和RNA 免疫共沉淀实验验证SNHG16和miR- 128-3p mRNA 靶向结合。构建小鼠SW480 细胞移植瘤模型，观察敲降SNHG16对移植瘤生长的影响。结果：CRC 组织及细胞系中SNHG16 高表达（均P0.01），其表达水 平与CRC 淋巴结转移、Duke ’s 分期及患者生存期相关（均P0.01）。敲降SNHG16可显著抑制SW480 细胞的增殖及侵袭能力，并 诱导细胞凋亡（均P0.01）；敲降SNHG16后小鼠移植瘤瘤体显著小于对照组(P0.05) 。双荧光素酶报告基因检测及RNA 免疫沉 淀反应结果显示，miR- 128-3p 与SNHG16相互作用，且在CRC 患者中miR- 128-3p 与SNHG16 负相关（P0.01) 。SNHG16通过内 源性竞争海绵吸附miR- 128-3p 影响其下游靶基因GPAM 的表达。结论：SNHG16在CRC 细胞中可通过海绵吸附miR- 128-3p 调 控GPAM 表达，SNHG16及miR- 128-3p 可作为CRC 诊断及治疗的潜在靶点。 [关键词] 结直肠癌；SW480 细胞；SNHG16；miR- 128-3p ；线粒体甘油3 磷酸酰基转移酶基因；海绵 [中图分类号] R735.3 ；R730.5 [文献标识码] A [文章编号] 1007-385X （2019 ）01-0058-09 Expression of lncRNA SNHG16 in colorectal cancer tissues and cells and its regu- lationon expression of GPAM in colon cancer cells 1 2 3 1 ZHOU Yunsong ，WEN Xiaohui , ZHANG Qi ，KOU Wei （1. Clinical Skill Training Ce