修改第六章胚胎培养课件学习资料.pptVIP

（三）接种方式 因为子房壁与花药不同，营养物质的通透性比较差，所以，子房培养时应采用适于营养物质吸收的接种方式。在大麦未授粉子房的培养中，花柄直插入培养基培养的诱导频率是子房平放于培养基培养的7倍，证明通过花柄输导系统吸收养料对提高诱导频率起着重要作用。特别是幼小子房的培养更是如此。但目前这方面的进一步研究还较少，其机制尚不清楚。 （四）单倍体的来源和发育途径 由未授粉子房培养产生单倍体植株的来源和发育途径是多种多样的。 1.助细胞或胚囊的无配子生殖产生单倍体在水稻的未受精子房培养中发现，其单倍体是由助细胞和胚囊的细胞无配子生殖产生的。开始产生两个原胚细胞，由它发育成胚状体。有些胚状体具有明显的胚柄，有的无胚柄。有些原胚细胞经过多次分裂产生愈伤组织，再由愈伤组织分化形成芽和根，最后形成小植株。 2.卵细胞、助细胞和反足细胞发育产生单倍体 在大麦和烟草未授粉子房培养中观察到，卵细胞(eggcell)、助细胞(synergid cell)和反足细胞(antipodalcell)都可以启动脱分化产生原胚细胞，而且在一个胚囊里常可以见到不同来源的胚状体。由卵细胞来源的胚状体产生的再生植株最好。 3.非正常发育的大孢子四分体产生单倍体 百合未授粉子房培养中，单倍体植株来源于非正常发育的大孢子四分体。由大孢子母细胞非正常发育，经减数分裂形成的大孢子母细胞继续分裂，形成胚性细胞团，进而形成愈伤组织或胚状体，最后分化形成单倍体植株。 第四节 离体受精 离体受精是指将未授粉的胚珠或子房从母体上分离下来，进行无菌培养，并以一定的方式授以无菌花粉，使之在试管内实现受精的技术，所以又称为离体授粉或试管受精。 * * 第六章 胚胎培养和离体受精 第一节 离体胚培养 合子胚指的是由雌雄配子融合形成的合子继而发育成的胚。对合子胚进行离体培养的主要目的是获得能正常生长发育的植株。 植物的胚发育一般是从受精以后的合子开始的。胚的组成除了由合子发育的胚以外，其整个子房都属于胚的范畴。根据在培养中所取的外植体的部位不同，植物胚培养包括胚培养、胚珠培养、子房培养和胚乳培养。 一、植物胚培养(一)胚培养的应用和类型1．胚培养的应用（1）克服远缘杂交不亲和性  远缘杂交中，由于胚乳发育不正常或杂种胚与胚乳之间生理上的不协调，造成杂种胚早期夭折。将早期幼胚进行离体培养，可克服这种受精后障碍，产生远缘杂种。 (2)打破种子休眠，缩短育种周期  许多植物的种子发育不完全或有抑制物存在而影响种胚发芽，如一些无胚乳种子(如兰科)蒴果成熟时，胚龄幼小，需与微生物“共生发芽”。银杏种子脱离母体后，胚龄幼小，仍继续吸收胚乳营养，4～5个月后才能成为成熟胚。通过幼胚培养，可促使这些植物的幼胚达到生理和形态上的成熟而提早萌发，形成植株。 (3)提高种子萌发率  长期营养繁殖的植物具有形成种子的能力，但其生活力较低，萌发成苗率低下，胚培养可促进这类种子萌发和形成幼苗。如芭蕉属有许多结实的品种，自然情况下胚不能萌发，如果取出胚，在简单的无机盐培养基中就能很快使其萌发形成幼苗。 二．幼胚培养Laibach在1925—1929年间，通过培养亚麻种间杂种幼胚，成功地获得了种间杂种，首次证实了这种方法在实际应用中的价值。他指出，在所有不能形成有生活力种子的杂交中，均可以采用幼胚培养产生杂种。李继侗1933年在银杏培养中发现胚乳提取物能够促进银杏离体胚的生长。这一发现为后人使用植物胚乳汁液、幼嫩种子及果实提取液等天然物质促进培养物生长提供了重要的启示和参考。 （一）幼胚培养的基本技术 1.取材 适宜于幼胚培养的胚发育时期多为球形胚至鱼雷形胚。以幼胚抢救为目的的胚培养取材，还应了解胚退化衰败的时期。一般来讲，幼胚死亡时间越早(如球形期之前)，抢救工作就越困难。 胚培养在取材时常常是连同果实一起取下来，然后对果实或种子进行消毒，由于胚包被在种皮内，因而一般是不带菌的。只要果实种子消毒彻底，在无菌条件下分离出的幼胚一般不会造成污染。漂白粉等。消毒灭菌后，必须用无菌水浸洗多次。 2.幼胚剥离  胚是一个植株的另一种形态，因此胚剥离的成功与否是幼胚培养能否成功的键。对于大多数植物的幼胚剥离来讲均要借助解剖镜，特别是那些种子较小的植物更是如此。  另外，幼胚是一种半透明、高黏稠状组织，剥离过程中极易失水干缩，因此，在剥离时一定要注意保湿，且操作要迅速。 3.接种培养  剥离出来的幼胚要立即接种到培养基上进行培养。胚培养相对于其它培养来讲要容易一些，但是，在培养之前必须对所培养的对象在自然