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②实验流程 土壤取样:富含纤维素的环境 ↓ 选择培养:用选择培养基培养,以增加纤维素分解菌的数量 梯度稀释 ↓ 涂布平板:将样品涂布于鉴别含CR的纤维素分解菌的培养基(固体) ↓ 挑选产生透明圈的菌落:产生纤维素酶的菌落周围出现透明圈。 (2)两种刚果红染色法的比较 ①方法一:先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,过程如下:培养基经涂布培养长出菌落→覆盖质量浓度为1 mg/mL的CR溶液 倒去CR溶液→加入1 mol/L的NaCl溶液 倒掉NaCl溶液→出现透明圈。 ②方法二:倒平板时就加入刚果红,过程如下: 配制质量浓度为10 mg/mL的CR溶液→灭菌→按照每200 mL培养基加入1 mL的比例加入CR溶液→混匀→倒平板→接种后培养→出现透明圈。 4.(2009年烟台模拟)可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是 ( ) A.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂 B.以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂 C.以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂 D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂 A 5.下图为分离并统计分解纤维素的微生物的实验流程,据此回答有关问题: (1)要从富含纤维素的环境中分离纤维素分解菌,从高温热泉中寻找耐热菌,这说明___________________。 根据目的菌株对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找 (2)某同学根据需要,配制了纤维素分解菌的培养基如下,整个实验过程严格执行无菌操作。 如果将其中的纤维素粉换成________,菌落数____________________________,即可说明选择培养基的作用。 (3)接种微生物最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法,本实验宜采用________法,原因是__________。 纤维素粉 NaNO3 Na2HPO4·7H2O KH2PO4 5 g 1 g 1.2 g 0.9 g MgSO4·7H2O KCl 酵母膏、水解酪素 0.5 g 0.5 g 适量 葡萄糖 明显多于选择培养基上的菌落数 稀释涂布平板 平板划线法难以根据稀释体积计算每克样品中的细菌数 【解析】 (1)因为纤维素分解菌与耐热菌有不同的生活习性,生活在不同的环境中,故要根据目的菌株对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。(2)因为葡萄糖是纤维素水解的、能被微生物直接利用的有机小分子,所以如果将其中的纤维素粉换成葡萄糖,纤维素分解菌及其他细菌会生长繁殖得更快,故菌落数明显多于选择培养基。(3)因为稀释涂布平板法要将菌液进行一系列的梯度稀释,故该法可根据稀释体积计算每克样品中的细菌数,而平板划线法则不能这样,所以本实验宜采用稀释涂布平板法。 (2009年高考浙江卷)下面是有关食醋和泡菜制作的实验。请回答: (1)食醋可用大米为原料经三步发酵来制作: 第一步:大米经蒸熟、冷却后加入淀粉酶,将原料中的淀粉分解成①________(填中间产物),然后进一步分解成葡萄糖,这一过程可用②________(填淀粉指示剂)来检测,因为该试剂遇淀粉呈蓝色,遇上述中间产物呈红色。 第二步:用③________菌将葡萄糖转化成乙醇,这一发酵过程中,玻璃发酵瓶不应完全密闭的主要原因是④____________。 第三步:用⑤________菌将乙醇转化成乙酸,这一过程⑥________氧气。 (2)泡菜发酵过程中,会产生多种酸,其中主要是⑦________,还有少量的亚硝酸。对亚硝酸盐的定量测定可以用⑧______法,因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与N-1-萘基乙二胺偶联成⑨________色化合物。进行样品测定时,还要取等量水进行同样的测定,目的是⑩________。 【解析】 淀粉在α-淀粉酶的作用下可先水解成糊精,然后再β-淀粉酶、糖化淀粉酶的作用下最后水解成葡萄糖;酵母菌可以进行有氧呼吸,也可以进行无氧呼吸产生乙醇;在泡菜发酵过程中,杂菌可能产生乳酸、乙酸等;醋酸杆菌在有氧条件下可以将乙醇转化成醋酸。 【答案】 (1)①糊精 ②碘液(KI-I2溶液) ③酵母 ④发酵过程中会产生大量CO2,使瓶内压力升高而可能引起爆裂 ⑤醋酸醋杆(醋酸杆) ⑥需要消耗 (2)⑦乳酸(或有机酸) ⑧(光电)比色 ⑨玫瑰红 ⑩作为对照 (2009年高考宁夏理综卷)(1) 在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑________、________和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、________、______等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。 (2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行______
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