生物信息学中生物学分子生物学.pptVIP

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内容 生物信息学中的生物学、分子生物学基础 基因工程和核酸研究技术简介 生物信息学中的生物学、分子生物学基础知识 地球上的生命史 120亿年前:第一次大爆炸,宇宙产生 50亿年前:太阳系诞生 40亿年前:海洋里出现了类似藻类的原始生物 30亿年前:出现原核细胞生物 7亿年前:演化出各种多细胞生物,无脊椎动物 5亿年前:寒武纪大爆发,海洋中出现大量物 种,大气中氧含量剧增 4亿年前:至留纪大爆发,O2↑, 生命进入陆地 350万年前:古脊椎动物中出现猩猩科和人科 50万年前:直立人出现,“北京猿人” 3.5万年前:早期智人出现 2万年前:早期人类出现,“山顶洞人” 生物的分类 生物分类体系: 界(Kingdom) 门(Phyla) 纲(Class) 目(Order) 科(Family) 属(Genus) 种(Species) 原核生物(Prokaryote): 古细菌(Archaea) 真细菌(Eubacteria) 真核生物(Eurokaryote) 生物的进化和亲缘关系: 遗传密码统一性 基本生物化学过程一致性 中心法则 谢谢! * 生物信息学中的生物学 分子生物学 共同祖先演化而来 Eubacteria Archaea Eucarya 噬菌体 病毒 大肠杆菌 酿酒酵母 秀丽线虫 果蝇 模式生物 拟南芥 水稻 非洲爪蛙 斑马鱼 家鼠 人 糖:单糖、双糖、多糖 作用:储存能量、结构材料、分子识别 脂肪酸:储存能量、参与代谢 核苷酸和核酸: A、C、G、T→DNA、RNA 氨基酸→蛋白质 构成生物的四类分子 DNA复制 DNA聚合酶→DNA单链5’ →3’复制 mRNA转录:mRNA前体→剪接 蛋白质翻译 mRNA反转录→cDNA 蛋白质折叠 分子生物学的中心法则 DNA DNA DNA cDNA 结构 蛋白质/酶 mRNA 转录 翻译 折叠 相互利用 复制 转录 表现型 基因型 基因工程和核酸研究技术简介 限制性内切酶(Restriction Endonuclease) 限制性内切酶 + 甲基化酶 载体:质粒、噬菌体、酵母 分子克隆: 聚合酶链反应(PCR) 超速离心 凝胶电泳 印迹法 DNA测序方法 阿尔伯 Wemer Arber 瑞士生物学家 巴塞尔Biozentrum大学 1929~ 内森斯 Danien Nathans 美国微生物学家 霍普金斯大学医学院 1931~ 史密斯 Hamilton O.Smith 美国微生物学家 霍普金斯大学医学院 1931~ 限制性核酸内切酶的发现者 凝胶电泳 琼脂糖电泳 聚丙烯胺凝胶电泳 脉冲场电泳 梯度电泳(DGGE/TGGE) 二维凝胶电泳:蛋白质电泳 16S rRNA gene PCR 16S-23S rRNA gene PCR M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 聚丙烯胺凝胶电泳 分离大分子DNA的方法。 脉冲场凝胶电泳 (PFGE,Pulsed Field Gel Electrophoresis) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 变性梯度电泳DGGE 温度梯度电泳TGGE 二维凝胶电泳 二维聚丙烯酰胺凝胶电泳技术结合了等电聚焦技术(根据蛋白质等电点进行分离)以及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(根据蛋白质的大小进行分离)。这两项技术结合形成的二维电泳是分离分析蛋白质最有效的一种电泳手段。 印迹法 凝胶→硝酸纤维膜→DNA探针(32P) DNA印迹法(Southern Blotting) RNA印迹法(Northern Blotting) 蛋白质印迹法(Western Blotting) Southern印迹杂交(Southern blot)是1975年由英国人southern创建,是研究DNA图谱的基本技术,在遗传病诊断、DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要价值。 Southern Blotting Northern Blotting 1979年,J.C.Alwine等提出:将电泳凝胶中的RNA转移到叠氮化的或其他化学修饰的活性滤纸上,通过共价交联作用使它们结合,因其方法同Southern杂交十分相似,故称之为Northern杂交。 Western Blotting 与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维

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