《动物细胞培养和核移植技术》课件1.pptVIP

自探提纲 1 动物细胞培养的过程 2原代培养与传代培养 3动物细胞培养的条件及应用 4体细胞核移植的过程 5体细胞核移植的应用前景 克隆羊“多莉” “人耳鼠”再出风头 2001年，一只特别的活老鼠在北京引起轰动——这是有着一对红眼睛的、尾巴长长的、浑身没毛的小白鼠。值得一提的是，这只小白鼠的背上，竟长着一只几乎与身子一般大小的“人耳”。这只老鼠背上的“人耳”是由上海市第九人民医院副院长、整复外科主任曹谊林教授利用组织工程技术复制出来的。 长有人耳的小白鼠 英国科学家近日用患者自身的细胞制成一种 名为“我的皮肤”的生物活性绷带，它给皮肤烧伤病人带来了福音。 他们先从患者身上采集一些细胞样本，再让其在特殊的膜片上增殖。5至7天后，就可以将这种特殊膜片敷在患者的伤口上，膜片会将患者自身的细胞逐渐“释放”到伤口，并促进新生皮肤层的生长，达到加速伤口愈合的目的。 以上资料，透露了怎样的信息？ 专题2.2动物细胞工程 动物细胞工程常用的技术手段 动物细胞培养—基础 动物细胞融合 单克隆抗体制备应用 核移植 一、动物细胞培养 为什么要进行动物细胞培养？ 材料一：在治疗烧伤病人时，通常是取病人的健康皮肤进行自体移植。对于大面积烧伤的病人，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，且会产生排斥反应。怎样才能获 得大量的自体健康皮肤呢？ 材料二：许多动物细胞能分泌蛋白质，如抗体等。但是，单个细胞产生的蛋白质很少，怎样才能获得大量的分泌蛋白呢？ 一、动物细胞培养 1、概念： 动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中, 让这些细胞生长和增殖. 怎样进行动物细胞培养？ 什么是动物细胞培养？ 该技术实施的原理是什么？ 细胞增殖原理 一、动物细胞培养 2、过程： 阅读课本P44-45 取动物组织块 剪碎组织 用胰蛋白酶处理分散成单个细胞 转入培养液，制成细胞悬液进行原代培养 贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，制成细胞悬液 转入培养液中进行传代培养 放入二氧化碳培养箱中培养 取什么样的材料好？幼龄与老龄动物的组织细胞比较，分化程度低的与分化程度高的组织细胞比较，哪一种更易于培养？ 为什么动物细胞要分散成单个细胞培养? 用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ 什么叫原代培养？ 什么是传代培养？ 用概念图的方式完成细胞培养的流程图 动物细胞培养中会出现什么特点？ 动物胚胎或幼龄动物器官组织 剪碎 胰蛋白酶 细胞悬液 10代细胞 原代培养 50代细胞 贴壁生长 接触抑制 传代培养 无限传代 细胞株 细胞系 培养液 适宜环境 对于目前使用或冷冻保存的细胞有什么要求？ 遗传物质未改变 遗传物质已改变 目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内,以保持细胞正常的二倍体核型. 二倍体核型:二倍体生物体细胞染色体组在有丝分裂中期的表现,是染色体数目、大小、形态特征的总和。 1957年，科学家采用胰蛋白酶消化处 理和应用液体培养基的方法，获得了单层 细胞培养。单层培养法的出现，对细胞培 养的发展起了很大的推动作用。此后单层 培养成为细胞培养普遍应用的技术。 一、动物细胞培养 3、条件： （1）无菌无毒的环境（添加一定量的抗生素，定期更换培养液） （2）营养（糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、 微量元素、血清等） （3）温度和PH（温度为36.5±0.5℃, PH为7.2－7.4） （4）气体环境（O2和CO2， O2是细胞代谢所必需 的， CO2的主要作用是维持培养液的PH） 阅读课本P46 为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？ 血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白质主要为白蛋白和球蛋白。氨基酸有多种，是细胞合成蛋白质的基本成分，其中有些氨基酸动物细胞本身不能合成（称为必需氨基酸），必须由培养液提供。血清激素有胰岛素、生长激素等及多种生长因子（如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、类胰岛素生长因子等）；血清还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质，能促进细胞的生长、增殖和贴附。因此，细胞培养时，要保证细胞能够顺利生长和增殖，一般需添加10%～20%的血清。 多细胞动物和人体细胞都生活在内环境中，根据所学内环境知识，思考并讨论：体外培养细胞需要提供哪些物质和什么样的环境条件？ 在科学研究中，有时需要明确界定培 养液的成分，而血清中由于含有许多未知 成分，会对研究结果有影响，因此，在进 行细胞培养时，也可采用无血清培养。无 血清培养基是在基本培养基中，添加一些 已知的促进细胞生长和增殖的物质。 一、动物细胞培养 4、动物细胞培养技术的应用： 大