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- 2019-11-03 发布于天津
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免疫酶组织化学技术; 第一节 基 本 原 理 ;免疫酶组化 ;PAP法;ABC法;免疫酶特点:
信号定位准确
标本可长期保存
阳性标记与病变关系
方法简便,易推广; 一、酶及其特点
酶选择标准:
★ 该酶用细胞化学易于被检出,能被光镜或电镜观察。
★ 酶反应产物须稳定,不扩散,具有良好定位。;?★ 酶易于纯化,获得纯制品。
★ 酶与免疫球蛋白结合后,不丧失其活性。
★ 酶在PH中性液内较稳定。
★ 组织中不应存在与底物作用的内源性酶。
;符合上述条件:
辣???过氧化物酶
碱性磷酸酶
葡萄糖氧化酶;(一)辣根过氧化物酶(HRP)
★ 分子量(40000),不会遮盖抗原的结合部位
★ 稳定,易获得较高纯度酶
★ 具有较高活性及特异性
★ 可溶性佳,生成的产物不扩散
★ 组织中内源性酶较少
★ 可作用于多种底物,产生不同颜色
★ HRP穿透力强,易进入细胞内; (二)碱性磷酸酶(AKP)
从小牛肠粘膜或大肠杆菌中提取
● 组织穿透能力较弱
● 内源性AKP较高
● 左旋咪唑具有抑制作用 ; (三)葡萄糖氧化酶(GOD)
底物为葡萄糖,终产物稳定
● 体内
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