农杆菌介导的桑树瞬时表达体系构建及miRn51与其靶基因的表达分析.pdfVIP

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2019-11-01 发布于湖北
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农杆菌介导的桑树瞬时表达体系构建及miRn51与其靶基因的表达分析.pdf

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Science of Sericulture 蚕业科学 2015 ，4 1 (1):0010 －0017 ISSN 0257 －4799 ;CN 32 － 1115 / S DOI :10 ． 1344 1/j ． cnki． cykx． 2015 ． 01． 004 农杆菌介导的桑树瞬时表达体系构建及miＲn51 与其靶基因的表达分析张大燕贾凌向仲怀何宁佳 ( ，， 4007 16) 家蚕基因组生物学国家重点实验室西南大学蚕学与系统生物学研究所重庆ＲNA (miＲNA) ＲNA ，。摘要微小是一类内源性非编码的单链小对植物的生长发育起着重要调控作用建立高效的桑树瞬 miＲNA 。 (Morus notabilis ) miＲn51 时表达体系是研究桑树及其靶基因功能的有效手段将川桑基因组中克隆的前体序列连接 PLGNL ， PLGNL-35S-miＲn51 ，。 GUS 到载体上构建了重组质粒通过农杆菌介导其在桑树叶片中瞬时表达采用组织化学染、 PCＲ，、、、色多酚氧化酶活性检测以及荧光定量等方法分析不同缓冲液重组农杆菌注射菌液浓度转化时间桑树品种等试验、miＲn51 ， 1 条件对农杆菌介导的桑树叶片瞬时表达体系转化效率及靶基因表达水平的影响当采用号缓冲液和菌 = D (600 nm) 0. 6 ， 3 d miＲn51 ， MnPPO2 液的重组农杆菌进行瞬时转化时转化桑树叶片后的表达量最高其靶基因的表达水，。，平受到明显抑制不同桑树品种对瞬时表达体系的瞬时表达效率有一定影响以上结果表明建立的农杆菌介导的桑树瞬时、、 miＲNA 。表达体系能简便有效快捷地验证桑树对其靶基因的调控作用 ; ; ; ＲNA ; 关键词桑树根瘤农杆菌瞬时表达微小靶基因中图分类号 Q943. 2 ;S888. 2 文献标识码 A 文章编号 0257 －4799 (2015)01－0010 －08 Construction