基因工程基本操作程序新.pptVIP

常用的受体细胞： 微生物细胞：大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌等； 动物细胞； 植物细胞； 三、将目的基因导入受体细胞 1、将目的基因导入植物细胞 （1）农杆菌 转化法 特点: 能感染双子叶植物和祼子植物,对单子叶植物无感染能力 农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞并整合到其染色体上 转化过程: Ti质粒 目的基因 构建 表达载体 导入 植物细胞 插入 植物细胞染色DNA 表达 新性状 转入 农杆菌 植物组织培养 （2）基因枪法 基因枪法又称微弹轰击法，是利用压缩气体产生的动力，将包裹在金属颗粒表面的表达载体DNA打入受体细胞中，使目的基因与受体细胞基因组整合并表达的方法。 适用于单子叶植物 （3）花粉通道法 植物花粉在柱头上萌发后，花粉管要穿过花柱直通胚囊。花粉管通道法就是在植物受粉后，花粉形成的花粉管还未愈合前，剪去柱头，然后，滴加DNA（含目的基因的基因表达载体），使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞。 适用于被子植物 2、将目的基因导入动物细胞 方法: 显微注射技术 操作程序: 提纯含目的基因表达载体 动物的受精卵 显微注射 移植到代孕母体的子宫 胚胎发育 新性状动物胚胎早期培养 转入生长素基因 新性状动物 3、将目的基因导入微生物细胞 常用法：Ca2+处理法/CaCl2法/感受态细胞法 常用菌：大肠杆菌 微生物