基因治疗肿瘤的策略与进展_生物探索.pptVIP

二、基因治疗的靶向性策略 带有目的基因的载体如何到达“靶细胞”是肿瘤基因治疗的关键。只有提高基因转导的靶向性,才能实现治疗的针对性和安全性。 目前解决基因的靶向转移及表达有3 种策略 ⑴ 用基因工程手段改造基因载体,如改造逆转录病毒包装细胞中的原病毒env 序列,使所包装的重组病毒特异地识别位于靶细胞表面的抗原或受体决定簇; ⑵ 在体内基因传递系统中共价连接抗瘤抗体和肿瘤细胞特异受体的配基,使基因在类似“生物导弹”作用下被送到肿瘤细胞表面; ⑶ 应用肿瘤细胞特异蛋白“管家基因”的基因表面调控元件,在转录水平调控目的基因在靶细胞中特异表达。国外已开始针对VEGF、VEGF-R1、VEGF-R2 设计反义基因或调控VEGF 的基因作为目的基因,这种思路很有发展前途。 三、外源基因在体内表达的可控性 外源基因导入后,在体内的表达若能人为调控,将对恶性肿瘤及诸多疾病的基因治疗有所突破。目前已经发现了一个可诱导的调控系统—TAXI/UAS 系统。该系统应用一个酵母GAL4 的顺式元件作为外源基因的上游,另组建一个激素受体(孕酮) 及一段GAL4 的反调控基因子的嵌体,将两个载体共转染靶细胞后,只有当诱导物(孕酮) 或其拮抗物(米非司酮) 存在时,目的基因才能表达。 四、其他原因 ⑴ 某些体内原代细胞转基因及基因表达水平往往不及体外建株细胞； ⑵ 靶基因在体内表达持续时间较短； ⑶ 在处理多系统基因紊乱过程中基因治疗的作用远未清楚； ⑷ 基因治疗刚开始用于人体实验，其长期疗效和不良作用尚不清楚，有待于大量的实验研究 问题与展望? 肿瘤基因治疗的研究进展很快，临床上在部分肿瘤中使用基因治疗已经显示出较好的抗癌、抑癌作用与较轻微的副作用，但还需要进一步增加该疗法的特异性与基因转导靶癌细胞的有效性研究。 目前使用最多的是病毒载体，如：逆转录病毒、腺病毒、腺相关病毒和疱疹病毒。非病毒的基因治疗方法包括：脂质体、无载体的DNA（裸DNA）注射、蛋白DNA复合物（基因枪）、磷酸钙试剂、电启动子、细胞内微量注射DNA等。 尽管在体内载体的转导与表达率尚不够理想，临床上还没有较全面的成功经验，但面对复杂的基因治疗，目前研究重点策略在于 ①增强对肿瘤的免疫反应。 ②修复细胞周期中由肿瘤抑制基因丧失或癌基因激活而造成的细胞DNA损伤。 ③自杀基因的策略还有基因标记研究与在基因治疗中对正常组织的保护措施等。 只有解决了这一系列问题后，基因治疗才能真正用于临床，造福于肿瘤患者。 知识回顾Knowledge Review BCR/ABL融合基因是定位于人9q34上的C-ABL基因和22q11上的BCR基因发生t(9:22)易位，使相应无关的基因发生融合而形成，它是PH染色体的分子基础，在CML发病中起到重要作用。 Borkhardt等采用RNAi技术成功地抑制了K562白血病细胞中的BCR/ABL融合基因mRNA的表达，增加对K562白血病细胞凋亡的诱导作用，但在联合ABL酪氨酸抑制剂--Imatinib治疗时，对细胞凋亡没有相加作用。 RNAi技术的快速发展必将推动生物学和医学的大步前进。RNAi在医学领域的应用也必将为各种疾病尤其是肿瘤等疾病的根治带来希望。但是,从目前RNAi的研究现状来看,在哺乳动物中,RNAi并不能完全阻断基因的表达,尤其是异常高表达的基因,这将促使人们去探索研究新的更高效siRNA表达载体体系。为了促进基于RNAi的基因药物进入临床研究和应用,大量的研究已集中到提高siRNA分子的工业化生产能力、增加siRNA分子稳定性、开发siRNA药物的靶向传递系统等方面。尽管如此,RNAi在癌症治疗中的应用已经取得非常大的成就,因此我们有理由相信RNAi必将对癌症的最终根治起到重要的作用。 第四节 核酶用于基因治疗? 1983年美国Cech和Altmann发现并鉴定了一类具有酶催化作用的核苷酸片断，称为核酶(Ribozyme)。这一发现使酶的概念从蛋白领域扩展到核酸领域。 核酶具有核苷酸内切酶的活性，它能在无蛋白质的条件下切割靶RNA分子。 核酶用于基因治疗的条件是 ①找出肿瘤发生发展中关键性的蛋白质； ②这种蛋白的氨基酸序列（和编码基因序 列）必须是已知的，以便设计核酶的切 割位点； ③所设计的核酶必须能够切割靶RNA； ④肿瘤细胞必须能摄取这种核酶， 并能在细胞内切割靶RNA。 反义治疗并不像刚开始人们所想像的那么简单，目前还有许多关键性问题有待去解决，如生物