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- | 1988-02-05 颁布
- | 1988-08-01 实施
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中华人民共和国国家标准
UDC 664.841.655
大豆制品中尿素酶活性测定方法 :543-062
GB 8622一88
Method for the determination of urease
activity in soya bean products
1适用范围
本标准适用于由大豆制得的产品和副产品中尿素酶活性的测定。本法可确认大豆制品的湿热处理
程度。
2 定义
本标准所指尿素酶活性定义如下:
在3。士。.5℃和pH7的条件下,每分钟每克大豆制品分解尿素所释放的氨态氮的毫克数
3 原理
将粉碎的大豆制品与中性尿素缓冲溶液混合,在30℃保持30min,尿素酶催化尿素水解产生氨的反
应 用过量盐酸中和所产生的氨,再用氢氧化钠标准溶液回滴。
4 仪器设备
4.1样品筛:孔径200pm;
4.2酸度计:精度0. 02pH,附有磁力搅拌器和滴定装置;
4.3恒温水浴:可控温30士。.5,C;
4.4试管:直径18mm,长150mm,有磨口塞子;
4.5精密计时器;
4.6粉碎机:粉碎时应不生强热(例如球磨机)
4.7分析天平:感量。.lmg;
4.8移液管:l OmL,
5试剂和溶液
5.1尿素(GB 696-77):分析纯;
5.2磷酸氢二钠(GB 1263-77):分析纯;
5.3磷酸二氢钾(GB 1274-77):分析纯;
5. 4尿素缓冲溶液(pH6. 9至7.的:4. 45g磷酸氢二钠((5.2)和3. 40g磷酸二氢钾((5. 3)溶于水并稀释
$ 1 OOOMI,再将30g尿素(5.1)溶在此缓冲溶液中,可保存1个月。
5.5盐酸(GB 622-77):分析纯,c(HCl)=0. lmol/L溶液;
5.6氢氧化钠(GB 629-77):分析纯,c(NaOH)=0. lmol/L标准溶液,按GB 601标准溶液制备方法
的规定配制。
中华人民共和国农牧渔业部1987一08一20批准 1988一08一01实施
GB 8622一88
6试样的制备
用粉碎机((4. 6)将log试样粉碎,使之全部通过样品筛(4. 1)对特殊试样(水分或挥发物含量较高
而无法粉碎的产品)应先在实验室温度下进行预干燥,再进行粉碎,当计算结果时应将干燥失重计算在
内。
7测定步骤
称取约。2g已粉碎的试样,称准至。lmg,转入试管((4.4)中(如活性很高只称0. 05g试样),移入
l OmL尿素缓冲溶液(5.4),立即盖好试管并剧烈摇动,马上置于30士。.5℃恒温水浴((4.3)中,准确计时
保持30min,即刻移入l OmL盐酸溶液((5.5),迅速冷却到200C。将试管内容物全部转入烧杯,用5m1.水
冲洗试管两次,立即用氢氧化钠标准溶液(5. 3)滴定至pH4. 70,
另取试管作空白试验,移入1OmL尿素缓冲液(5.4),1OmL盐酸溶液((5. 5)。称取与上述试样量相
当的试样,也称准至0. lmg,迅速加人此试管中。立即盖好试管并剧烈摇动将试管置于30士。.5℃的恒
温水浴,同样准确保持
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