有机化学实验-曾小耘9_纸层析-20140519.pptVIP

实验结果 * 实验9 纸层析 实验目的 实验原理 实验仪器和试剂 实验步骤 注意事项 实验结果 思考题 实验目的 了解纸层析的基本原理 掌握纸层析的基本操作技术 实验原理 纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析。 滤纸纤维吸附水作为固定相，有机溶剂为流动相。 当流动相流经固定相时，物质在两相间不断分配而得到分离。 由于它们的分配系数不同，不同氨基酸随流动相移动的速率就不同，于是就将这些氨基酸分离开来，形成距原点不等的层析点。 溶质在滤纸上的移动速度用Rf 值表示： 一定的物质在两相间有固定的分配系数，在恒定条件下，各物质有固定的Rf 据此可达到分析鉴定的目的。 原点至展开剂前沿的距离 原点至层析斑点中心的距离 = Rf l m n A B A+B Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、 层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。 仪器： 层析缸 层析滤纸 直尺 铅笔 毛细管 电吹风 试剂： 展开剂： 正丁醇:醋酸:乙醇:水 = 4:1:1:2 显色剂: 1%茚三酮丙酮溶液 样品: A:丙氨酸(2%)乙醇溶液 B:丙氨酸(2%)和亮氨酸(2%)混合溶液 丙氨酸： 亮氨酸： 实验仪器与试剂 实验步骤 1 准备 2cm A B 手不要接触 滤纸中部 A丙氨酸 B丙氨酸+亮氨酸 2 点样 点样干后再点一次 点样直径不超过3mm 3 展开 滤纸垂直 不要淹没滤纸起点线 不要跟层析缸壁接触 层析缸封闭 20 min 划出展开剂前沿位置 电吹风吹干 4 显色 喷茚三酮溶液 电吹风吹干溶剂 直至紫红色斑点出现 划出斑点的轮廓 标出斑点的中心 n m l 5 计算 注意事项 实验过程中手不要接触滤纸中部 实验成败决定于点样的好坏，要求点的样直径不超过3mm 展开剂不要淹没滤纸上起点线；起点线应与展开剂液面平行；滤纸不要跟层析缸玻璃壁接触；展开时层析缸封闭 分别计算丙氨酸和亮氨酸的Rf值 每人单独操作，样品层析滤纸附在实验报告上 Rf值的意义是什么？哪些因素会影响Rf值？ 在纸层析时，层析缸为什么要求尽量封闭？ 思考题 *