吸光光度法的灵敏度与准确度知识讲解.pptVIP

8.3 吸光光度法的灵敏度与准确度; 2. Sandell(桑德尔)灵敏度 (S) 定义：截面积为1cm2的液层在一定波长或波段处，测得吸光度为0.001时所含物质的量。 用S表示，单位：?g·cm-2 A= ? bc=0.001 bc ＝0.001/ ? ;例1 邻二氮菲光度法测铁?(Fe)=1.0mg/L,  b=2cm , A=0.38 计算? 、S 和; c =1.0mg/L=1.0×10-3 g /1000mL = 1.0×10-4 g/100mL;8.3.2 准确度—仪器测量误差;测量误差公式推导:;10;8.4.1 显色剂与显色反应 ;有机显色剂;显色反应的选择 ;8.4.2 显色条件的确定;2. 显色反应酸度（c(M)、 c(R)一定）;邻二氮菲－亚铁反应完全度与pH的关系 ;pH3～8为适宜 的酸度范围;25℃;8.4.3 测定中的干扰以及消除方法;Co2+, Zn2+, Ni2+, Fe2+ ;2. 物理法—选择适当的测定波长; 1. 仅络合物有吸收，溶剂作参比。 如 phen—Fe2+ 标准曲线 2.待测液也有吸收，被测液作参比。 如 测汽水中的 Fe 3. 显色剂或其他试剂也有吸收，空白溶液作参比 例:邻二氮菲光度法测Li2CO3中的 Fe， 参比溶液为不含Li2CO3样品的所有试剂。 4. 干扰组分与显色剂有反应,又无法掩蔽消除时： 1）掩蔽被测组分，再加入显色剂，作参比. 2）加入等量干扰组分到空白溶液中,作参比. ;8.5 吸光光度法的应用;3. 蛋白质测定—溴甲酚绿、考马司亮蓝等 4. 氨基酸测定—茚三酮(紫色化合物) 5. 水质检测: NH4+、NO2-、Mn2+、Fe2+、SO42-、Hg2+---- 6. 药物含量测定—比吸光系数定量；荷移光谱法测定. 7. 紫外吸收(UV): NO2-、NO3-、SO42-、SO32-、CO32-、SCN-、酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋白质等。;8.5.2 多组分的测定; 8.5.3 光度滴定;典型的光度滴定曲线;8.5.4 络合物组成的测定;2. 等摩尔连续变化法:;8.5.5 一元弱酸离解常数的测定;MO吸收曲线;8.6 紫外可见分光光度法在有机定性分析中的应用;跃迁;;n→?* 跃迁（带孤对电子的杂原子与其他?键共轭）;π→π* 跃迁（不饱和烃类);电荷迁移跃迁（荷移光谱）;8.6.2 有机分子中的生色团与助色团;生色团举例-1;生色团举例-2;生色团举例-3;不饱和基团助色效应大;反助色团;共轭烯烃键数与能量的关系;双键数;苯吸收带（溶剂：异辛烷）;苯环共轭的影响;苯的同系物的吸收光谱; ?Kmax＝220nm， ?Bmax＝270nm ε＝800 非共轭(两环不共平面);羰基化合物;8.6.3 溶剂极性对吸收光谱的影响;酸碱性导致物质结构发生变化;溶剂极性增大， n ? ?* 吸收蓝移;溶剂极性增大， ? ? ?* 吸收红移;溶剂极性影响的结论:;常用溶剂的光学透明区;习 题