(育种学）生物技术在园艺植物育种中的应用.ppt

* 二 突变细胞的筛选方法 用一种含有特定物质的选择培养基，在此培养基上只有突变细胞能够生长，非突变细胞不能生长，从而直接筛选出突变体。如抗除草剂、抗盐碱突变体的筛选，均可直接在培养基中加入一定浓度的除草剂或增加渗透压的物质。 贾敬芬等以小麦幼胚愈伤组织为材料，在含有1.4％ NaCl的N6培养基上直接筛选出小麦耐盐系。分析显示，耐盐系游离氨基酸含量是供体亲本的4.1倍。 正向选择: * * 间接选择: 间接选择法是一种借助于与突变表现型有关的性状作为选择指标的筛选方法。 Dorffling等以Pro类似物羟脯氨酸（HYP）为选择剂，获得了耐HYP的体细胞变异系，其抗寒性比供体亲本增强，且能稳定遗传。 林定波等将锦橙珠心细胞愈伤组织的悬浮细胞经γ射线照射，然后在高浓度脯氨酸培养基中培养筛选，获得了抗寒体细胞变异愈伤组织，并再生植株。鉴定显示，抗寒愈伤组织及其再生植株的抗寒性分别比供体提高1.4 ℃和2.4 ℃，突变系体内的Pro含量比供体增加了一倍。 * 三 突变性状遗传基础及其稳定性鉴定 体细胞变异，除发生在染色体水平外，更多的是基因水平上的变异。 从利用体细胞变异的角度，染色体变异大多是一些畸形变异，真正可利用的染色体变异十分有限。 基因水平上的变异在表型上大多只是个别性状的改变，不会影响再生植株的正常生长发育。因此，从再生植株的这些变异中有可能筛选有益的变异。 基因水平上的变异，从根本上讲是DNA的碱基突变或修饰状态的改变。 * 玉米幼胚所诱导的愈伤组织在继代繁殖后，用NaCl作选择剂，在含质量浓度10～20 g·L-1 NaCl的N6筛选培养基上连续筛选3代，再转移到无盐的继代培养基上培养3代，得到耐20mg·L-1的抗盐愈伤组织变异体。 耐盐株自交得T1代种子，在不同质量浓度NaCl胁迫下测定其发芽率，耐盐变异体后代种子发芽率均高于对照种子发芽率，说明变异体的耐盐性是可遗传的。 * 农业上有用性状的突变体离体筛选 对病害的抗性 对土壤障碍的抗耐性 对除草剂的抗性 对温度的抗耐性 * 第五节 基因工程与育种 植物基因工程（plant genetic engineering）：指以类似工程设计的方法，按照人们的意志，通过一定的程序，将具有遗传信息的DNA片断，在离体条件下，用工具酶加以剪切、组合和拼接，再将人工重组的基因引入适当的植物受体中进行复制和表达的技术。 转基因植物：ransgenic plant 转基因技术: Transgenic technique * 一 、基因工程的基本步骤和方法 目的基因的分离与鉴定 植物表达载体的构建 植物的遗传转化 转化植物细胞的筛选及转基因植物的鉴定 基因分离、克隆 农杆菌介导 基因枪介导 基因插入Ti/Ri质粒载体 农杆菌侵染植物 包裹DNA的微粒弹 质粒DNA制备 基因质粒进入植物细胞 DNA整合进植物染色体 基因枪轰击植物细胞 检测转基因 筛选转基因细胞 转基因细胞再生植株 检测转基因 农杆菌和基因枪介导基因转化流程图 * * 二 基因工程在园艺植物育种中的应用 改良品质 提高抗病虫能力 改良抗逆性 提高光合作用和固氮效率 创建雄性不育材料 延迟成熟与保鲜 选育抗除草剂品种 * 第六节 分子标记与育种Molecular marker breeding * 形态标记（morphological markers） 细胞学标记（cytological markers） 生化标记（biochemical markers） 分子标记（molecular markers） 遗传标记的种类 遗传标记（genetic markers）：鉴别基因组中基因位点(site)的手段，是易于识别且可遗传的实体。 种类： * 形态标记 形态标记：指那些能够明确显示遗传多态性的外观性状，如株高、果形、花色、叶形、花瓣数多少、核有无或抗逆性、抗病性等。 特点：简单直观，长期以来，作物种质资源鉴定及育种材料的选择一般都是根据形态标记进行的，但是形态标记数目少，多态性差，易受环境因素的影响。 应用实例： 园艺植物品种识别 枳在柑桔原生质体融合中的应用 * 细胞学标记 细胞学标记：染色体的结构特征和数量特征是常见的细胞学标记，它们分别反映了染色体结构上和数量上的遗传多态性。染色体结构特征包括染色体的核型(染色体相对长度、臂指数、着丝粒指数、染色体臂数等)和带型(Constitutive heterochrom -ative banding带、Necleolar organizer region banding带、Giemsa banding带等)。 特点：可明确鉴定许多物种中任一染色体。操作复杂